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线粒体拷贝数奥秘

已有 118 次阅读 2025-9-8 15:00 |系统分类:教学心得

衰老、代谢病、肿瘤、抑郁……越来越的研究指向同一个幕后推手——线粒体DNA拷贝数(CNV)异常。然而,传统SYBR法灵敏度参差、重复性差,细胞/游离两种状态还得分别买试剂盒?费时、烧钱、数据还不稳!

上海翼和生物 Mitochondrial CNV Detection Kit 重磅上线!一套试剂,双色TaqMan探针绝对定量,同时搞定:

1. 细胞内线粒体CNV

2. 血浆游离线粒体CNV(ccf-mtDNA)

试剂盒技术原理

线粒体拷贝数检测试剂盒采用双色荧光 TaqMan 探针法绝对定量技术,具有极高的准确性和灵敏度。

对于细胞内线粒体检测,利用 FAM 荧光标记的线粒体特异性探针,结合标准曲线 A(线粒体通道 FAM),精准计算线粒体拷贝数;同时,HEX 荧光标记的内参探针则根据标准曲线 B(内参通道 HEX)计算细胞数目,实现对细胞内线粒体拷贝数的精确评估。

对于游离线粒体检测,同样运用 FAM 荧光标记探针检测线粒体拷贝数,HEX 荧光则用于质控游离基因组 DNA 抽提的质量,确保检测结果的可靠性。

这种双色荧光 TaqMan 探针法不仅提高了检测效率,还有效减小了孔间差异,使结果更为稳定。

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三步操作,解锁科研新高度

1. 样本质控:DNA纯度(A260/A280≈1.8)与浓度标化(10 ng/μL),确保数据基线统一;  

2. 标准曲线构建:两倍梯度稀释标准品,3次重复上机,自动生成线性方程(R2≥0.999),告别人为误差;  

3. 智能校正:通过校正品计算系数K2,一键校正样本数据,实现“样本拷贝数=K3×K2×标准品拷贝数”的精准输出。  

【应用场景】

衰老机制研究✅ 肿瘤早期筛查标志物开发✅ 代谢病(糖尿病、心血管)风险评估✅ 细胞治疗/线粒体移植质控✅ 大样本队列流行病学调查

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