快速微生物检测方法（rapid microbiological method, RMM），依据中国药典的分类标准，主要基于三种原理：1）微生物培养，即分析生长过程中的化学成分、电荷、气体、能量，如依赖于ATP或ATP合成酶得到的荧光，又如二氧化碳检测；2）活细胞识别，如利用荧光标记细胞进行计数的流式细胞术或固相细胞计数；3）微生物生物组成成分的检测，如基于核酸、蛋白、脂肪酸来检测。

用于确定生物制品中细菌真菌的DNA含量的分析程序可以是定量PCR（q-PCR）或其他DNA扩增方法。

基于TaqMan探针荧光定量PCR原理的检测方案：选择细菌（金黄色葡萄球菌、生孢梭菌、枯草牙孢杆菌、铜绿假胞杆菌）和真菌（白色念珠菌和黑曲霉）基因中特异基因片段，分别设计引物和荧光探针，快速检测4种细菌和2种真菌的基因组DNA。

结合相关的样本前处理和DNA抽提方案，本试剂盒可以检测各类生物制品和细胞培养物中潜在的金黄色葡萄球菌、生孢梭菌、枯草牙孢杆菌、铜绿假胞杆菌、白色念珠菌和黑曲霉污染。

原理图

优势特点

灵敏：配合推荐使用的核酸抽提方案，检测灵敏度达到10CFU/mL。

可靠：抽提加入内标核酸，全过程质量控制。

稳定：全程闭管操作，无交叉污染。

快捷：单管可同时检测6种菌种，检测效率高。

准确：样本设置3重复，避免假阴、阳性的出现。

合规与创新：满足药典标准

翼和试剂盒严格遵循RMM（快速微生物检测）理念，符合以下法规要求：

中国药典2020年版：支持替代方法验证，满足9201指导原则。

USP<1223>与EP 5.1.6：提供完整的验证参数（灵敏度、特异性、重复性）。

细胞治疗产品指导原则：适用于中间样品无菌检查，助力快速放行。