Phorbol 12-myristate 13-acetate 是 NF-κB 激活剂。Phorbol 12-myristate 13-acetate 可诱导 THP-1 细胞分化(已经经过 MCE 专业的生物实验验证)。Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 是一种佛波酯，是蛋白激酶 C (PKC) 和 SphK 的激活剂。

目录号： HY-18739（https://www.medchemexpress.cn/Phorbol-12-myristate-13-acetate.html）；

CAS：16561-29-8；别名：佛波酯； PMA; Phorbol myristate acetate

Cell Assay 细胞检测[2]

αT3-1和LβT-2细胞在37°C、5%CO2的加湿培养箱中的DMEM中单层培养。

血清饥饿是在相同的培养基中用0.1%FCS饥饿16小时。

然后添加GnRH和PMA，持续指定的时间长度。

通常，αT3-1细胞通过ExGen 500或通过jetPRIME瞬时转染，而LβT2细胞仅通过jetPRIME转染试剂瞬时转染。

对于显性阴性（DN）PKC的实验，用1.5 μg p38α-GFP与3 μg对照载体pCDNA 3或3 μg DN-PKC构建体转染αT3-1细胞（在6cm板中）。

对于LβT2细胞，用4 μg p38α-GFP沿着9 μg对照载体pCDNA 3或9 μg DN-PKC构建体进行转染（在10 cm平板中）。

转染后约30小时，将细胞血清饥饿（0.1%FCS）16小时，随后用GnRH或PMA刺激，用冰冷的PBS洗涤两次，用裂解缓冲液处理，然后进行一个冻融循环。

收获细胞;离心（15，000 ×g，15 min，4°C）后，取上清液进行免疫沉淀实验。

Animal Administration 动物给药

老鼠[3]所有实验均用雄性Wistar大鼠（体重250-280 g）进行。135只Wistar大鼠随机分为7组。(1)假手术组（n=21）侧脑室注射0.9%生理盐水：(2)缺血再灌注组（n=21）在大脑中动脉闭塞（MCAO）前30 min侧脑室注射0.9%生理盐水;(3)甘珀酸（CBX）组（n=21）侧脑室注射甘珀酸(4)Sch-6783组（n=21）侧脑室注射DZX（2 mM×30 μL）;(5)5-HD组（n=21）侧脑室注射5-HD（100 mM×10 μL），10 min后，在MCAO前15 min注射DZX;(6)DZX + Ro组（n=15）侧脑室注射DZX，10 min后，(7)5-HD+PMA组（n=15）在注射5-HD和DZX后腹腔注射PMA（200 μg/kg）。

参考文献

[2]. Zhang T, et al. MPTP-Induced Depletion in Basolateral Amygdala via Decrease of D2R Activation Suppresses GABAA Receptors Expression and LTD Induction Leading to Anxiety-Like Behaviors. Front Mol Neurosci. 2017 Aug 7;10:247.

[3]. Schwende H, et al. Differences in the state of differentiation of THP-1 cells induced by phorbol ester and 1,25-dihydroxyvitamin D3. J Leukoc Biol. 1996;59(4):555-561.

细胞实验：

DMSO 中的溶解度 : 100 mg/mL (162.12 mM; 超声助溶)

Ethanol 中的溶解度 : 100 mg/mL (162.12 mM; 超声助溶)

动物实验：

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

方案 一

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% Saline

Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

方案 二

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% (20% SBE-β-CD in Saline)

Solubility: 2.5 mg/mL (4.05 mM); 悬浊液; 超声助溶

此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

方案 三

请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 90% Corn Oil

Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

方案 四

请依序添加每种溶剂： 10% EtOH 40% PEG300 5% Tween-80 45% Saline

Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (4.05 mM); 澄清溶液

此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

方案 五

请依序添加每种溶剂： 10% EtOH 90% (20% SBE-β-CD in Saline)

Solubility: 2.5 mg/mL (4.05 mM); 悬浊液; 超声助溶

此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。