叶酸（Folic Acid）及其代谢产物是生命活动的“隐形守护者”，参与DNA合成、细胞分裂和神经发育。这4种物质分别是：叶酸（59-30-3），5-甲基-四氢叶酸（134-35-0），5-甲酰基-四氢叶酸（58-05-9），5，10-亚甲基-四氢叶酸（7444-29-3）。如何精准追踪这些化合物？液质联用技术（LC-MS/MS） 凭借高灵敏度与选择性，成为解析叶酸代谢网络的关键工具！

聚焦4种核心叶酸代谢物

1️⃣ 叶酸（59-30-3）

角色：膳食维生素B9的主要形式，需经肠道吸收后转化为活性代谢物。

检测痛点：水溶性强，易受食物基质干扰，需强化提取效率。

2️⃣ 5-甲基-四氢叶酸（134-35-0）

角色：血液中主要活性形式，为DNA甲基化提供甲基（如S-腺苷甲硫氨酸循环）。

临床意义：低水平与神经管缺陷、高同型半胱氨酸血症密切相关。

3️⃣ 5-甲酰基-四氢叶酸（58-05-9）

角色：嘌呤合成的关键底物，支持RNA/DNA生物合成。

研究热点：肿瘤细胞增殖中的代谢标记物，与化疗耐药性相关。

4️⃣ 5,10-亚甲基-四氢叶酸（7444-29-3）

角色：胸苷酸合成的直接供体，维持基因组稳定性。

病理关联：叶酸缺乏时堆积，可能诱发染色体断裂和突变。

二、生物学意义：四个物质各显神通

Norminkoda可以提供这4个物质一次性检测。

⚡ 三、检测挑战：为何必须4个物质同时锁定？

1. 结构相似性：

这四种关键代谢物因结构相似、功能迥异，精准检测面临巨大挑战。

2. 动态平衡：

叶酸 → 5,10-亚甲基THF ↔ 5-甲基THF（依赖MTHFR酶活性）。

5-甲酰基THF可逆转化为5,10-亚甲基THF，参与嘌呤从头合成。

3. 临床转化价值：

同时检测可评估叶酸代谢效率（如MTHFR活性）、药物毒性（如甲氨蝶呤干扰）及营养干预效果。

四、液质联用（LC-MS/MS）：精准解析的终极方案

1. 技术突破点

色谱分离：采用C18柱+梯度洗脱，结合离子对试剂，实现四者完全分离。

质谱定性：

一级质谱：精确分子量（误差<3ppm）区分同分异构体。

二级质谱：特征碎片离子（如5-甲基THF的m/z 176→129，5-甲酰基THF的m/z 176→159）确认结构

2. 样本前处理

（1）每100mg生物样品加1.0 mL提取液，充分混匀；

（2）低温超声提取20 min；

（3）12000 rpm离心10 min，取上清用微孔滤膜（0.22 μm pore size）过滤样品，并保存于进样瓶中，用于UPLC-MS/MS分析，全程需要避光条件下进行。

五、数据结果

图1 : 标准品总离子流图

图2 : 标准品MRM多峰图

图3 : TIC重叠图

延伸应用：叶酸代谢研究的无限可能

精准医学：基于MTHFR基因型+代谢物谱，制定个体化补充方案。

毒理学：评估酒精、药物（如抗癫痫药）对叶酸代谢的抑制作用。

农业科学：植物中叶酸生物强化研究，提升粮食营养价值。

Norminkoda可以提供个性化靶向检测，欢迎关注咨询！

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