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狂犬病免疫力检测(13)

已有 1578 次阅读 2026-7-19 04:06 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病免疫力检测(13)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第4版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第13章是《Measures of rabies immunity(狂犬病免疫力检测）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第13章狂犬病免疫力检测(13)

（Measures of rabies immunity）

3 检测方法的选择(2)

（Assay selection）

在选择适当的检测方法时，对样本的考量也是一个因素。试图用一种依赖于结合免疫球蛋白Fc段的二抗检测系统ELISA来测量F(ab’)2产物将是徒劳的。阻断或竞争ELISA或血清中和试验更适合这一目的，因为这些检测并不依赖免疫球蛋白的完整结构，而仅依靠抗原结合片段 F(ab’)2 进行检测。样本的状况对最终生成结果的质量有很大影响。在 SN 试验中，样品中对组织培养细胞有毒性的成分会带来独特的挑战，尤其是在针对野生动物的监测野外样本中。缓解这一问题的方法已有多种，例如利用细胞单层并在血清-病毒孵育后去除毒性血清 (Bedekovic et al., 2013)。ELISA 方法已被证明有助于减少“受污染”野外样本的干扰 (Bedekovic et al., 2016)。使用滤纸采集和运输野外样本的方法也已开始实施 (Wasniewski, Barrat, Combes, Guiot, & Cliquet, 2014)。

非特异性抑制也是使用SN方法检测人源样本时遇到的问题。导致这些非特异性反应的因素难以捉摸，但一项研究发现患有其他传染病的急性期患者体内存在交叉反应性抗体 (Rudd et al., 2013)。有趣的是，研究表明能提供化学防护（先天免疫分子）对抗微生物的生物活性化合物也会抑制 RABV (Cunha Neto Rdos et al., 2015)。这类分子可能存在于血清中，并在 SN 试验中导致非特异性抑制。

在人类实验医学中，通常使用灵敏的检测方法进行初筛，以区分阳性和阴性样本，然后跟进使用更具特异性的检测进行确证，以识别真正的阳性样本并排除假阳性。有几种方法可有效用于筛查目的。根据筛查目标，使用全病毒抗原的ELISA、显示阳性或阴性结果的侧向层析以及 IFA 等方法，可以识别出可能含有RABV特异性抗体的样本。使用western blot技术检测可以确认筛查中检测到的抗体特异性，或者使用血清中和 (SN) 方法检测可以确认抗体的中和功能。对于口服饵剂监测而言，一种准确度较低（结果可能不是真值）但精密度较高（重复测量结果虽然可能不接近真值但聚类紧密）的筛查方法，如果它快速、标准化且简单，可能比繁琐、耗时且变异性更大的高精度方法更有用。为了评估口服疫苗饵剂投放活动的效果，确定个体“保护力”不如群体免疫水平以及在实验室间和随时间推移自信地进行结果比较的能力重要。

最有效的狂犬病预防计划会在各个步骤中包含狂犬病血清学检测，例如注册和许可新的狂犬病疫苗、监测人类和动物的免疫状态、实施动物疫苗接种活动、开展狂犬病监测和流行病学调查，以及最终维持无狂犬病区。因此，选择最佳的“适合目的”血清学检测方法，并确保检测操作得当以及建立充分的质量保证程序，对于计划的成功至关重要。有效的狂犬病血清学结果会影响国际贸易协定、新建和现有无狂犬病区的建立与维护、新疫苗的持续开发以及科学期刊上发表的研究或监测结果的评估。了解方法的性能特征以及利用既定的质量保证程序正确执行检测，是确保结果有效、可重复且适用于目的的最有效途径。

（未完待续）