线粒体作为细胞的“能量工厂”，其DNA拷贝数的异常与衰老、糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病及肿瘤等多种疾病密切相关。然而，线粒体在细胞内和游离状态下的动态变化一直是研究难点。上海翼和推出的线粒体拷贝数检测技术，凭借先进的双色荧光TaqMan探针技术，为科研与临床提供了高效、精准的解决方案。
采用双色荧光TaqMan探针法定量PCR，通过FAM荧光通道计算线粒体拷贝数，HEX荧光通道同步检测细胞数目或质控游离基因组DNA抽提质量。双重荧光设计不仅显著提升检测效率，还能减小孔间差异，确保结果稳定可靠。与传统的SYBR Green法相比，TaqMan探针法特异性更强，准确度更高，尤其适用于低丰度样本的检测。
核心优势一盒双测：同一试剂盒可检测细胞内和游离线粒体拷贝数，满足多样本类型需求。
高性价比：多重反应设计减少试剂用量，降低实验成本。
精准分析：标准曲线双重校准，确保拷贝数定量绝对准确。
检测流程
1. 样本采集与处理使用EDTA抗凝管采集血液样本，避免使用肝素抗凝。样本采集后需在30分钟内分离血清，并在-20℃保存以备后续检测。对于细胞样本，需确保DNA纯度（A260/A280 ≈ 1.8）并标化浓度至10 ng/µL。
2. 标准品与校正品的准备标准品以两倍梯度稀释，形成不同浓度梯度的标准曲线。校正品用于校正检测结果，确保检测的准确性。
3. qPCR反应体系与条件根据样本数量准备qPCR反应体系，包括检测Mix、引物和探针等。反应条件通常包括预变性、变性、退火和延伸步骤，荧光信号在延伸阶段收集。
4. 数据分析通过标准曲线方程计算样本中mtDNA拷贝数，并结合校正系数进行绝对定量。检测结果以每细胞或每毫升样本中的mtDNA拷贝数表示。
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