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细胞鉴定过程中性别鉴定的AMEL基因

已有 82 次阅读 2025-11-26 09:43 |个人分类:细胞|系统分类:科研笔记

细胞STR鉴定

细胞鉴定的目标是确认细胞的身份真实性,排除交叉污染。细胞 STR(短串联重复序列)鉴定是目前国际通用的细胞系身份认证标准,通过分析这些STR 位点信息,确认细胞系真实性、排除交叉污染(如 HeLa 细胞污染),从而为科研领域、生物制药领域、临床应用提供可靠的细胞身份保障,保障数据的准确性和可复制性,保障生产的安全性。

 

性别鉴定的应用场景

性别鉴定在个体识别、亲子鉴定、刑事侦察中有着非常重要的作用。特别面对微量检材、陈旧检材时对鉴定方法的要求更高,需要检测方法适合微量取材、检测方法更准确、更灵敏和更快速。

 

性别鉴定的检测方案

1)细胞学染色法进行性别鉴定方案

可采用染色法进行性别鉴定。人类体细胞中含有23对常染色体和1对性染色体,一对性染色体即X染色体和Y染色体。一般来说,女性有2条X染色体,男性为1条X和1条Y染色体。可采用细胞培养、吉姆萨方法染色,根据染色体上的带纹可识别染色体,进行性别鉴定,这种检测方法结果直观、易于判读,但是检测时耗时、成本高。

2)利用分子生物学法进行DNA检测判断性别

当前有一种高效、灵敏、准确度高、操作简单的性别鉴定方案,就是DNA分子检测,其中PCR扩增是相对简单的检测方案,如:单纯扩增Y染色体特异性DNA、同时扩增X及Y染色体同源DNA片段、同时扩增X、Y染色体特异性片段鉴定性别。如果只扩增Y染色体特异性序列可能会因为扩增失败导致假阴性。

同时扩增X及Y染色体同源DNA片段是一种有效的手段,目前常见的基因有两个:ZF基因和AMEL基因。ZF是锌指状蛋白基因,AMEL基因编码牙釉质蛋白。这两个基因均是X、Y染色体同源的基因。通过扩增含有差异序列的片段,来区分X和Y染色体。

锌指状蛋白基因(zine finger protein gene,ZF)是X和Y染色体的同源基因,但是3’序列略有差异,用特异性引物进行扩增时可产生不同的片段,女性只产生一条片段,男性可产生2条片段。

Amelogenin(AMEL)基因是另外一个性染色体同源的基因,编码一种牙釉质蛋白,AMEL 基因的致病性突变会导致牙釉质发育不全。利用AMEL-X和AMEL-Y序列的差异可以进行性别鉴定。AMEL-X和AMEL-Y有很高的同源性,X染色体AMEL内含子1中有6 bp丢失,第5外显子有3 bp的缺失,可针对性设计特异性引物序列,产物片段大小不同,可用于区分不同性别。

基于ZF和AMEL基因的PCR检测方法简便、灵敏、快捷,实践中具有较高的应用价值。

 

细胞鉴定中性别鉴定的检测方案

目前很多的细胞鉴定数据库中的性别鉴定位点选择的都是AMEL基因,因为扩增片段长度比较短,对于一些存在裂解的样本也能很好的完成检测。常用的细胞鉴定数据库中将AMEL基因作为性别鉴定基因,同时检测CSF1PO、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、TH01、TPOX、vWA等STR位点,不同的细胞品系可以同数据库中的信息进行比对来确定细胞身份。

 细胞鉴定性别鉴定(1).png

 



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