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细胞/血清游离线粒体DNA拷贝数检测

已有 93 次阅读 2025-7-15 10:01 |系统分类:科研笔记

在衰老研究、肿瘤诊疗和慢性病管理的浪潮中,线粒体DNA(mtDNA)正成为炙手可热的生物标志物。上海翼和应用生物技术有限公司深耕分子诊断领域多年,全新推出 MtDNAcn 50 检测试剂盒,以“双色荧光 qPCR + 绝对定量”核心技术,为细胞及血清游离 mtDNA 拷贝数检测提供高效、稳定、可重复的解决方案。

 

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一、产品亮点  

1. 双色荧光探针(FAM + HEX)  

   • 同步扩增线粒体基因与核基因内参,真正做到单孔双检,省时省样。  

2. 绝对定量,结果更可信  

   • 配套已知拷贝数标准品 A 与校正品 B,构建双标准曲线,校正批次差异,轻松实现绝对定量。  

3. 广泛样本适配  

   • 适用于细胞 gDNA、血清/血浆游离 DNA,满足衰老、代谢、肿瘤等多领域研究需求。  

4. GMP 级生产,批批质控  

   • 严格按 GMP 规范生产,每批试剂盒均通过功能性质检,确保批次间稳定性。

 

二、性能数据  

• 扩增效率:95–105%  

• 重复性:CV < 3%  

• 线性范围:10^1–10^6 拷贝  

• 适用平台:ABI 7500、QuantStudio 系列、Roche LightCycler 等主流 qPCR 仪

 

三、操作流程——三步上手  

1. 样本制备:EDTA 抗凝全血 30 min 内分离血清,DNA 提取试剂盒即提即用。  

2. qPCR 体系:18 μL 预混液 + 2 μL 模板(10 ng/μL),石蜡油封闭,防蒸发。  

3. 程序运行:95 ℃ 2 min →(95 ℃ 15 s → 56 ℃ 1 min → 72 ℃ 30 s)× 40,72 ℃ 采集荧光。

 

四、数据分析——轻松获得绝对拷贝数  

• 标准品 3 点梯度自动生成线粒体与内参双标准曲线。  

• 校正品计算批次校正系数 K2,一键修正,结果更精准。  

• 样本 Ct 值代入方程,即可得到细胞或每毫升血清中的 mtDNA 拷贝数。

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五、应用场景  

• 衰老与长寿研究:评估线粒体功能衰退趋势。  

• 肿瘤液体活检:检测循环游离 mtDNA,辅助早期诊断与疗效监测。  

• 代谢性疾病:探索糖尿病、心血管病等与 mtDNA 拷贝数变异的关联。  

• 药物毒理:监测药物对 mtDNA 的影响,优化安全性评价。

 



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