LY294002是一种广泛使用的、高效的细胞可渗透的合成小分子抑制剂，它特异性靶向磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）。PI3K是一个在细胞生存、增殖、代谢和运动等关键信号通路中扮演核心角色的酶家族。LY294002是第一个被广泛表征和应用的PI3K化学抑制剂，自其发现以来，已成为研究PI3K信号通路功能的“金标准”工具药，尽管因其药代动力学性质不佳而未进入临床治疗领域，但在基础科研中具有不可替代的地位。
化学性质化学名称：2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮
分子式：C₁₉H₁₇NO₃
分子量：307.35 g/mol
CAS号：154447-36-6
外观：通常为白色至类白色粉末
纯度：99%
厂家：AbMole
溶解性：在二甲基亚砜（DMSO）中具有高溶解度（例如，可配制成10-100 mM的储存液）。在含水缓冲液中溶解度较低，因此实验时通常从DMSO储存液稀释而来。
稳定性：固体粉末应在-20°C条件下干燥、避光保存。其DMSO储存液也应分装并冻存于-20°C或-80°C，避免反复冻融以维持稳定性。
原理机制LY294002的作用机制是通过竞争性地结合PI3K的ATP结合口袋，从而可逆地抑制该酶的催化活性。具体而言，PI3K被细胞外信号（如生长因子）激活后，会催化细胞膜上的磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）磷酸化，生成第二信使磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）。PIP3随后募集Akt（也称为蛋白激酶B，PKB）等信号分子到细胞膜上并被激活，进而触发一系列促进细胞存活、生长和增殖的下游信号事件。LY294002通过抑制PI3K的活性，有效地阻断了PIP3的产生，从而导致Akt的磷酸化（激活）水平下降，并最终抑制整个PI3K/Akt信号通路的传导。值得注意的是，LY294002也被发现能够抑制其他一些激酶，如mTOR和DNA-PK，在较高浓度时可能产生脱靶效应。
实验应用LY294002在生物化学和细胞生物学研究中有极其广泛的应用。其主要用途是作为一种工具药，用于探讨PI3K信号通路在各类细胞生理和病理过程中的功能。在肿瘤学研究领域，它常被用于证明特定癌细胞的增殖、存活、侵袭或对化疗药物的抵抗性是否依赖于PI3K/Akt通路。在细胞生物学中，它被用来研究通路在细胞代谢（如葡萄糖摄取）、自噬（LY294002本身也是自噬抑制剂）、细胞周期进程和分化中的作用。此外，通过使用LY294002，研究人员能够有效地区分PI3K依赖的信号事件与其他并行通路（如MAPK/ERK通路）所介导的事件。它在多种细胞模型，包括原代细胞、肿瘤细胞系以及三维培养模型中，均有广泛应用。
注意事项在使用LY294002时，有几个关键的注意事项需要牢记。首先，由于其在水溶液中的溶解性差，必须使用高纯度的DMSO配制储存液，并在工作液中确保DMSO的最终浓度对细胞无毒性（通常低于0.1%）。其次，为了获得可靠的结果，抑制剂的工作浓度和作用时间需要根据具体的细胞类型和实验目标进行优化，常用的有效浓度范围通常在1-50 μM之间。再者，如前所述，LY294002并非绝对特异，在较高浓度时可能抑制mTOR等其他激酶，因此在实验设计和结果解读时需考虑其潜在的脱靶效应。最后，该化合物对光敏感且具有潜在的生物毒性，操作时应穿戴适当的个人防护装备，并在避光条件下进行。
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