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Cy5.5 | MCE

已有 232 次阅读 2025-4-24 17:10 |系统分类:博客资讯

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Cy5.5

MCE 国际站：Cy5.5

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-D0924

CAS：210892-23-2

Synonyms：Sulfo-Cyanine5.5

纯度：99.88%

存储条件：4°C，避光保存 *溶剂中：-80°C，2 年；-20°C，1 年（避光保存）

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Cy5.5 是一种 CY 染料。CY 为花菁 (Cyanine) 的缩写，是由奇数个甲基单位连接的两个氮原子组成的化合物。菁类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高、水溶性好、合成相对简单等特点。CY 系类染料常被用于蛋白，抗体以及小分子化合物的标记，对于蛋白抗体的标记，可以通过简单的混合反应来完成结合，以下我们介绍了蛋白抗体标记的标记方法，具有一定的参考意义。

生物活性：Cy5.5 (Sulfo-Cyanine5.5) 是一种近红外荧光染料 (Ex=673 nm, Em=707 nm)，用于标记生物分子，如肽、蛋白质和寡核苷酸^{[1]。体外：Cy5.5 含有一个游离胺基，可以与多种官能团结合，包括 NHS 酯和环氧化物。激发和发射最大值分别为 678 和 694 nm。 Cy5.5 已应用于各种基于荧光的实验。 Cy5.5 是一种远红外（和近红外）发射染料，非常适合需要考虑背景荧光的荧光测量。 Cy5.5 具有成本效益且其标记化学物质易于操作，因此适合潜在的抗癌药物开发^[1]。体内： Cy5.5 标记的因子 VIIa 是为想象癌症而开发的。用这些靶向蛋白标记的 Cy5.5 特异性定位于肿瘤异种移植物至少 14 天，但未结合的 Cy5.5 不定位于任何异种移植物或器官。这种对肿瘤 VEC 中的抗组织因子进行成像的方法可用于检测原发性肿瘤和转移灶，以及监测体内治疗反应^[1]。与 Cy5.5 标记的乳铁蛋白结合的 pH/温度敏感磁性纳米凝胶（Cy5.5-Lf-MPNA 纳米凝胶）被开发为胶质瘤术前 MRI 和术中荧光成像的有前途的造影剂^[2] .}

体外：原液制备 1. 蛋白准备为了获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 2 mg/mL。 1) 蛋白溶液 pH 值应为 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。 2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会大大降低，为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。 3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中，否则会影响标记效率。 2. 染料准备将无水 DMSO 稀释 CY 染料，制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或旋涡充分混合。注：CY 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。使用前需先使用缩合液 (500 μg/mL) (HY-D0178) 活化后方可进行后续标记实验。 3. 染料工作液用量计算标记反应所需的 CY 染料用量取决于要标记蛋白的用量，CY 染料与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。例：假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),，用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，则所需 CY 体积的详细计算流程如下 (以 CY3-NHS ester 为例) ： 1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol 2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol 3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 917.05 mg/mmol / 0.01 mg/μL 使用方法 1. 标记反应 1) 取算好用量的新鲜配制的 10 mM CY 染料活化（大约 10 μL 的母液加 50μL 500 μg/mL 缩合液活化），缓慢加入到 0.5 mL 蛋白样品溶液中，轻轻摇匀混合，然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀，防止蛋白样品变性失活。 2) 将该反应小管置于避光处，在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟，每隔 10–15 分钟，将反应小管轻轻颠倒几次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。 2. 蛋白纯化脱盐以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。 1) 按照生产说明书制备 SepHadex G-25 柱。 2) 将反应混合物装入 SepHadex G-25 色谱柱顶部。 3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。 4) 向所需样品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

体内：Cy5.5 标记的因子 VIIa 是为肿瘤成像而开发的。用这些靶向蛋白标记的 Cy5.5 特异性定位于肿瘤异种移植物至少 14 天，但未结合的 Cy5.5 不定位于任何异种移植物或器官。这种对肿瘤 VEC 中的抗组织因子进行成像的方法可用于检测原发性肿瘤和转移灶，以及监测体内处理反应[1]。与 Cy5.5 标记的乳铁蛋白结合的 pH/温度敏感磁性纳米凝胶（Cy5.5-Lf-MPNA 纳米凝胶）被开发为胶质瘤术前 MRI 和术中荧光成像的有前途的造影剂[2]。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Emission (Em)：710

Excitation (Ex)：680

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参考文献：[1]. Zhu S, et al. Visualizing cancer and response to therapy in vivo using Cy5.5-labeled factor VIIa and anti-tissue factor antibody. J Drug Target. 2015 Apr;23(3):257-65.[2]. Jiang L, et al. pH/temperature sensitive magnetic nanogels conjugated with Cy5.5-labled lactoferrin for MR and fluorescence imaging of glioma in rats. Biomaterials. 2013 Oct;34(30):7418-28.[3]. Lim B, et al. A Unique Recombinant Fluoroprobe Targeting Activated Platelets Allows In Vivo Detection of Arterial Thrombosis and Pulmonary Embolism Using a Novel Three-Dimensional Fluorescence Emission Computed Tomography (FLECT) Technology. Theranostics. 2017 Feb 26;7(5):1047-1061.[4]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108.[5]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029

品牌介绍:• MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；• 50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；• 产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；• 提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；• 设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；• 提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；• 产品的生物活性多经各国客户实验验证；• Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；• 专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；• 与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。