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Veterinary Sciences：2022年保加利亚马科动物西尼罗河病毒血清阳性率调查及部分风险因素评估

2026-3-6 16:57

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西尼罗病毒 (West Nile virus, WNV) 是一种由蚊媒传播的人畜共患病毒，可感染多种动物宿主。来自特拉基亚大学兽医微生物学系的 Nikolina Rusenova 博士及其团队在Veterinary Sciences 期刊上发表研究，分析了保加利亚15个省份共378份马属动物血清样本的WNV血清流行率，并评估ELISA与病毒中和试验 (VNT) 的检测一致性。结果显示WNV血清流行率为3.97%，ELISA的敏感性和特异性分别为100.0%和94.5%。研究发现地区、海拔、饲养方式及品种与WNV感染存在相关性，提示马属动物可作为评估保加利亚地区WNV风险的重要指标。

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图为 (a) 保加利亚地图，显示了采样省份及各省内ELISA和VNT阳性样本的分布。注：NW—西北部；NC—中北部；NE—东北部；SW—西南部；SC—中南部；SE—东南部。采样省份以灰色表示；未采样的省份为白色。黑色圆圈表示WNV-ELISA阳性样本的数量，红色圆圈表示WNV-VNT阳性样本的数量；(b) 保加利亚海拔地图，显示WNV-VNT阳性样本的分布。

研究过程与结果

本研究共收集了2022年7月至10月间来自保加利亚15个省25个市镇的378份马属动物血清样本 (其中马314份，驴64份)，动物年龄为1–30岁。所有动物均健康，采样信息包括性别、品种、饲养方式、海拔、采样地区及月份。样本经颈静脉采血、分离血清并于−80 °C保存至2023年6月检测。血清经ELISA检测WNV特异性E糖蛋白抗体 (Ingezim West Nile Compac试剂盒)，按阻断率 (IP)≥40%判定为阳性。部分阳性及阴性样本送至意大利OIE参考实验室，采用竞争性IgG和IgM ELISA (IDvet) 及病毒中和试验 (VNT) 进行复核。VNT检测针对WNV与密切相关的Usutu病毒，通过中和滴度判定阳性结果。若样本对两种病毒的中和滴度相差四倍以上，则判为滴度较高病毒阳性。统计分析采用ROC曲线评估cELISA相对VNT的诊断效能 (AUC值、灵敏度与特异性)，并利用Mann–Whitney检验和卡方检验分析不同变量间差异。通过Logistic回归计算各风险因素 (地区、品种、饲养方式、海拔等) 与WNV感染的关联强度 (OR及95% CI)。

在对378份血清样本进行Ingezim West Nile Compac ELISA检测中，共有35份样本呈阳性 (9.26%，CI=6.45–12.88)，抑制率范围为76.20%–99.95%。除一份可疑样本外，其余阳性样本经参考实验室竞争性IgG-ELISA复核均被确认。经病毒中和试验 (VNT) 确认WNV阳性的样本为15份，血清流行率为3.97% (CI=2.22–6.55)。中和抗体主要分布于五个省份，阳性率在1.35%–28.21%之间，中和滴度为1:10–1:80，其中60%的动物滴度为1:10，少数动物滴度高达1:80。未检测到Usutu病毒特异性抗体，亦无样本呈现对两种病毒中和滴度均阳性或结果不确定的情况。统计分析显示，WNV血清阳性与动物年龄 (p=0.9125)、种类 (马/驴，p = 0.9778) 及性别 (p = 0.6417) 无显著相关性，但与地区 (p < 0.0001)、海拔 (p < 0.0001)、品种 (p = 0.0365)、饲养方式 (p < 0.0001) 及采样月份 (p = 0.0150) 显著相关。Logistic回归分析表明：西北地区动物感染风险比西南地区高13倍；海拔≤109 m的动物感染风险高16倍；纯种动物感染风险比杂交动物低5倍；有遮蔽饲养的动物感染风险比露天饲养高21倍。

研究表明，保加利亚马属动物存在WNV感染风险，且该感染具有本地化特征。虽然部分ELISA阳性样本未通过VNT确认，但ELISA在WNV抗体检测中具有较高灵敏度和较好特异性。研究还发现，保加利亚部分地区可能存在其他基因相似的正黄病毒，需进一步探索。此研究填补了保加利亚WNV和Usutu病毒血清检测的空白，能够为评估相关地区人类风险提供重要依据。