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[转载]新品推介——碱性磷酸酶(ALP/AKP)活性检测试剂盒

已有 52 次阅读 2025-6-11 08:58 |系统分类:论文交流|文章来源:转载

诺敏科达新推出一款货号为NMK1002的生化试剂盒,引入质控品(Quality Control, QC)确保实验结果准确性和可靠性,通过“快速、精准、易操作”的核心优势,解决了传统ALP检测步骤繁琐、灵敏度不足的问题,尤其适合实验室高效开展ALP活性分析。无论是科研探索还是临床前研究,它都能提供可靠的数据支持!

一、产品简介:

磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化,磷酸酶的作用与激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如 ATP,将磷酸基团加到对应底物分子上。

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP 或 AKP)广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,这种酶能催化核酸分子脱掉 5'磷酸基团,从而使 DNA 或 RNA 片段的 5'-P 末端转换成 5'-OH 末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有 AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。其中第 1、2、6种均来自肝脏,第 3 种来自骨细胞,第4种产生于胎盘及癌细胞,而第 5 种则来自小肠绒毛上皮与成纤维细胞。

该酶在人体中的主要功能是催化磷酸酯键的水解反应,其最适 pH 值接近 9.8,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物

二、检测原理:

本试剂盒提供一种灵敏度高、操作简单且快速的方法对碱性磷酸酶酶活进行检测,即利用对硝基苯磷酸二钠(pNPP)作为底物,在反应体系中,碱性磷酸酶催化 pNPP 水解产生对硝基苯酚(pNP),对硝基苯酚在碱性条件下显色,并在 400 - 415nm 处有最大吸收峰,可以通过比色法测定产物 pNP 的生成量,从而计算出碱性磷酸酶活力。

三、检测步骤:

3.1 标准溶液的配制:

将标准品用蒸馏水进行稀释,得到不同浓度的标准品。

3.2 样本提取:

准确称取适量样本于离心管中,按照说明书样本制备步骤提取样本,得到样本上清备用。

3.3 测定步骤:

酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,按照加样表顺序加样,在400nm处读取吸光值。

四、样本测值:

以标准品浓度(μmol/mL)为横坐标,对应的变化吸光值为y轴,绘制标准曲线。将样品吸光值代入标准曲线,计算样品中AKP含量μmol/mL。标准曲线如下图所示:

图片                                 图1:AKP的标准曲线图片                               图2:液体及组织样本测值情况

五、小结:

5.1 高灵敏度 & 快速检测

比色法直观高效:通过pNPP底物水解生成有色产物pNP,400-415nm处显色峰值显著,肉眼可观察显色变化,配合酶标仪定量,10分钟孵育即可完成反应。

全程仅需20分钟:从样本处理到结果计算,标准化流程设计大幅缩短实验时间,适合高通量检测。

 5.2 多维度兼容性

样本类型广泛:支持血清/血浆、植物组织、动物组织等多种样本,前处理简单。

多指标灵活计算:提供3种酶活单位计算方式(U/mgprot、U/L、U/g),适配不同研究需求(如蛋白浓度校正、组织含量分析)。

多规格可选:96T/48T规格可选,满足不同检测规模需求,减少试剂浪费。

5.3 数据可靠性保障

质控体系完善:随盒附带质控品,支持实验过程质量控制。

抗干扰设计:试剂经优化可减少内源性干扰,确保低背景信号和高信噪比。

标准曲线精准校准:内置6个浓度梯度标准品,线性范围广,实验结果可溯源(见图1标准曲线)。

Norminkoda提供碱性磷酸酶(ALP/AKP)活性检测比色法试剂盒,酶标仪仪器使用的96T(NMK1002-96T)和48T(NMK1002-48T),欢迎关注咨询!

声明:本文内容及图片部分来源于已见刊的文献,内容观点仅代表个人解读,具体参考原文.



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