邓倩云
大鼠小鼠仙台病毒(SV)的RT-qPCR检测
2026-8-25 15:45
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 一、仙台病毒检测方法体系仙台病毒是实验鼠重要的呼吸道病原体之一,难控制的病毒感染属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)副粘病毒亚科。在实验动物生产管理中,仙台病毒(Sendai virus)作为副黏病毒科的单股RNA病毒,感染后难以清除,易干扰科研实验数据。其脂质包膜结构使其能在环境中持续传播。在自然条件下仙台病毒感染发生在小鼠、大鼠、豚鼠,兔子等仙台病毒是GB14922-2022中SPF大鼠小鼠的必检病毒项目。现行国家标准GB/T 14926.23-2026《实验动物 仙台病毒检测方法》2026 年 8 月 1 日起实施,同时废止 GB/T 14926.23-2001适用范围:小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔等实验动物二、仙台病毒检测方法体系

仙台病毒检测方法有以下几种:ELISA(酶联免疫吸附)

IFA(免疫荧光)

IEA(免疫酶染色)

HI(血凝抑制)

实时荧光定量 RT-PCR

免疫法是通过检测抗体的方式检测仙台病毒的存在,但是抗体的产生有个窗口期,所以抗体的检测时间相对滞后,但是可以检测到实验动物仙台病毒的既往感染历史。实时荧光定量 RT-PCR是通过PCR的方法检测仙台病毒核酸,检测时间比抗体的检测早一些。

2026 版GB/T 14926.23-2026《实验动物 仙台病毒检测方法》变化新增 RT-PCR 核酸检测,可在抗体产生前(感染早期)直接检出病毒,缩短窗口期。

三、样本采集

ELISA检测:采集血清样本

核酸检测样本:采集仙台病毒主要富集的部位,例如气管、肺、口咽拭子、盲肠内容物、粪便等

四、RT-PCR检测

翼和大小鼠病原体质量控制多重qPCR检测试剂盒采用Taqman荧光定量PCR技术,多重检测,能一次检测多种病原体,满足检测多种微生物的需求,降低了实验成本,节省了实验的时间。使用的Biowing®Required Virus Primer&Probe能够匹配到包含仙台病毒在内的八项国标必检病毒。也可以搭配SPF.M/R-RVF-001 检测试剂盒对仙台病毒进行鉴定。

RT-PCR 检测过程中需要满足NTC对照:无 Ct 值、无扩增曲线,且阳性对照:Ct ≤ 32 且有典型扩增曲线。可以对样本检测进行判读。但是PCR过程需要分区进行操作,避免气溶胶的污染。

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