染色体核型分析方法
2026-3-31 14:56
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1. 制片
根据细胞沉淀的量，加入适量的固定液，轻轻吹打均匀。取4℃预冷的干净载玻片，滴细胞悬液2-3滴于载玻片上，染色体分散仪中静置干燥。一般一个病人滴片2-3张。标片按样本号进行标记，按顺序放在玻片板上。
2. 烤片老化置于90℃烤箱中烘烤2小时后取出待显带。
3. 显带3.1. 配制胰酶消化液配制后，置于染色缸中；同时准备一缸蒸馏水/生理盐水；37℃水浴预热30 min左右。3.2. 配制吉姆萨染液3.3. 试片将老化后的玻片选取1张在37℃预热后的胰酶消化、清水漂洗，放入染缸染色4-5min，后大量清水冲洗，然后在显微镜下观察带纹，以掌握合适的消化时间。带纹的标准为能清晰的区分染色体上的深带和暗带，末端的浅带也有显示。3.4. 大量标本消化，集中染色，漂洗，晾干玻片粘贴标本号后置玻片板，待上机。3.5. 上机扫描和图像采集按《Auto Vision显微图像自动扫描和分析系统标准操作规程》进行染色体图片扫描。通常设定每片扫描100张图片。如遇嵌合或复杂核型，加扫一片。3.6. 染色体核型阅片、校片、报告审核及出具按《染色体核型阅片、校片、报告审核及出具标准操作规程》操作。
4.2. 如发现有3个细胞丢失同一条染色体则算一个细胞系，有2个细胞增加同一条染色体则算一个细胞系，同时具有二种以上细胞系的，样本应加大计数到100个。产前样本根据《胎儿染色体核型分析判读指南》相应扩大计数，并标出各细胞系所占比例。
4.3. 对性畸形及高度怀疑性染色体异常的病人应加大染色体的计数，即计数50个、100个分裂相。
4.4. 对于药典要求的细胞，分常规分析20个、50个、100个、500个以及1000个（按知客户要求），统计多倍体、超二倍体、亚二倍体、染色体结构畸变等比例；对具有代表性的数目与结构异常，均要独立进行核型分析并报告。
4.5. 技术人员完成计数与分析后，填写《细胞遗传室分析记录表》，由细胞遗传实验室负责人进行校对，交细胞遗传室复核；遇有疑难问题，报告组织外部相关人员会诊。
4.6. 所有玻片及阅片记录应存档和管理，多余的玻片可销毁，并严格执行国家有关隐私的规定。
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