患者源性异种移植（PDX）鼠肿瘤模型是将患者新鲜肿瘤组织移植至免疫缺陷小鼠体内而构建的活体模型，主要的优势在于完整保留原发肿瘤的分子生物学特征、组织病理学结构及肿瘤微环境的异质性，能高度模拟人类肿瘤的生长、转移及药物治疗的反应，已成为肿瘤基础研究与临床转化的重要工具。由于其更贴近病人的肿瘤遗传特性和异质性，PDX模型不断受到药企和科研院所的青睐。
一、PDX鼠肿瘤模型的标准化构建流程
PDX模型的构建需遵循严格的无菌操作与质量控制规范，流程包括肿瘤样本的获取与处理、移植宿主的选择、异源肿瘤组织的移植操作、移植术后监测及传代验证五个关键环节。
PDX模型在构建过程中受制于异源移植物免疫反应，所以免疫缺陷动物选择很重要，需要确保人类肿瘤组织顺利生长，移植宿主的选择需选用免疫缺陷小鼠以避免移植排斥反应。常用实验动物品系包括：
裸鼠（先天性胸腺缺失，T细胞缺陷）；
NOD-SCID小鼠（T、B细胞双重缺陷，无自然杀伤细胞活性）；
B-NDG小鼠（重度免疫缺陷，缺乏成熟T、B、NK细胞）
二、移植后监测与成瘤验证1. 常规监测：移植后每日观察小鼠精神状态、饮食及活动情况，测量计算肿瘤体积，绘制生长曲线。
2. 成瘤判定：肿瘤体积生长至一定体积时判定为成瘤成功。
3. 特征验证：成瘤后通过HE染色、免疫组化（IHC）等方法，验证移植瘤与患者原发肿瘤的组织形态、分子标志物及基因组特征一致性，确保模型有效性。
三、PDX肿瘤模型中的人源鼠源比例检测
为维持模型稳定性，需将第一代移植瘤传代以后的模型可用于正式实验。随着肿瘤培养和传代次数的增加，人源比例可能随传代下降，甚至出现第 3 代后几乎无人源间质细胞，完全被鼠源基质取代，人源细胞比例逐渐降低，肿瘤保真度下降。人源比例的下降可能会导致失去原始肿瘤的组织架构和分化特征，基因表达谱与原始肿瘤差异增大，影响肿瘤标志物，对治疗的敏感性与临床实际不符，导致出现假阴性/阳性结果，影响药物研发决策。
翼和生物开发的PDX模型质控检测试剂盒PDX50采用双色荧光探针 qPCR（FAM+HEX）检测PDX模型总DNA中小鼠DNA的比例，并以此推导小鼠细胞浸润比例，检测对象为肿瘤组织DNA。试剂盒具有以下特点：
1. 稳定：全程闭管操作，无交叉污染。
2. 可靠：样本与多个内标同板检测，减少孔间干扰。
3. 方便：操作简单，无需电泳步骤。
4. 定量：△CT 值，可定量检测
PDX模型成功后需要进行PDX肿瘤模型中的人源鼠源比例检测，对模型的质量进行评估，保重模型的成功，对后续的研究和治疗提供有利的保障。
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