外泌体，作为细胞间通信的关键信使，其在疾病诊断、药物递送和再生医学等领域展现出巨大的应用潜力。然而，如何从复杂的生物样本中高效、高纯度地分离出外泌体，是后续所有功能研究与临床应用的首要挑战和基石。不同的样本类型、体积大小和研究目的，决定了分离技术的选择策略。

一、常规样本分离方案

超速离心法

原理：依据密度和粒径差异进行梯度离心。

特点：金标准，纯度较高，但耗时较长。

超滤离心法

原理：通过滤膜截留外泌体。

特点：操作简便，适合大体积样本初步浓缩。

沉淀法

原理：使用聚合物（如PEG）沉淀外泌体。

特点：回收率高，但可能共沉淀杂质。

二、小体积样本分离方案

免疫磁珠法/亲和磁珠法

原理：通过抗体结合外泌体表面标志蛋白（如CD9、CD63）。

特点：高特异性，适合低浓度样本。

尺寸排阻法

原理：基于粒径大小在凝胶柱中分离。

特点：保留外泌体活性，适合功能实验。

膜亲和柱法

原理：结合膜过滤与亲和吸附。

特点：快速纯化，适合微量样本。

三、大体积样本分离方案

切向流过滤

原理：连续过滤浓缩，保留目标颗粒。

特点：适合规模化制备，效率高

研究者选择合适的技术方案，是解锁外泌体生物学功能、推动其从基础科研走向临床转化的关键第一步。

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