产酸克雷伯菌是克雷伯菌属中的一个重要物种,形态呈直杆状,通常较粗短,大多数菌株具有多糖荚膜,无鞭毛,无芽孢。
根据中国国标GB14922-2022《实验动物微生物、寄生虫学等级及监测》产酸克雷伯菌未被列为SPF级动物必须排除的病原体。
但杰克逊(JAX)实验室作为全球领先的遗传资源库和实验动物供应商,对实验动物的微生物质量控制极为严格。产酸克雷伯菌被JAX实验室明确列为“排除性病原体”,即其供应的所有品系实验动物(尤其是免疫缺陷品系)均要求无此菌定植。免疫缺陷小鼠是该菌的高风险群体,研究发现,免疫缺陷小鼠中产酸克雷伯菌的检出率达4.55%。
其造成的风险如下:
机会性致病性:可导致免疫缺陷小鼠(如NSG、NOG品系)的致命性感染(败血症、肺炎)。
干扰实验结果:在肠道、呼吸道或系统性感染模型中可能改变免疫反应或病理结局。
耐药性风险:其多重耐药性可能影响抗生素治疗实验的可靠性。
阳性结果处理
立即隔离:阳性动物及同笼动物移至独立隔离设施。
群体处置:
免疫健全鼠:尝试抗生素治疗(根据药敏,如阿米卡星+头孢他啶)。
免疫缺陷鼠:直接淘汰(因治疗无效且高致死风险)。
设施净化:
过氧化氢蒸气或含氯消毒剂处理环境;
连续3次环境检测阴性(间隔1周)后方可重启。
质量控制体系
标准菌株:ATCC13182定期验证PCR及生化试验准确性。
环境监测:每月对IVC笼具出风口、饮水系统采样,采用PCR筛查。
人员操作:无菌服+手套+口罩,单向物流避免交叉污染。
灭菌管理:
饲料/垫料:121℃高压灭菌30分钟或钴-60辐照(≥25kGy);
饮水:酸化处理(pH2.5-3.0)抑制革兰阴性菌生长。
JAX实验室检测方法
选择性培养+生化确认
麦康凯琼脂分离→挑取粘稠乳糖发酵(粉红色)菌落→革兰染色→关键生化试验(吲哚+、鸟氨酸+)。辅助检测:VP试验(+)、柠檬酸盐利用(+)、尿素酶(+)
PCR检测
金标准方法:使用多种特异性引物,灵敏度高(可检测低载量菌),特异性强。
测序验证
对疑似菌株进行基因测序确认。
JAX实验室相比普通商业供应商的培养法+生化鉴定更注重PCR实验。翼和病原菌检测试剂盒能够很好的检测产酸克雷伯菌在内的多种病原微生物,符合实验室的要求,使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能够匹配到目标病原微生物的DNA。
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