邓倩云
[转载]大小鼠中绿脓杆菌的感染和检测方法
2025-6-14 22:13
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绿脓杆菌广泛存在于自然界中革兰氏阴性杆菌常寄生于人和动物的体表、呼吸道、消化道,免疫力下降是重要的发病诱因,当机体免疫力低下时可引起全身性感染在烧伤感染中绿脓杆菌检出率较高也有绿脓杆菌引起新生儿腹泻爆发流行的案例

对实验动物而言SPF 小鼠及无菌小鼠被绿脓杆菌感染后,多数不表现症状,以潜伏感染为主,当宿主免疫系统受损,常可引起感染、炎症、败血症甚至死亡等。但进行医药、生物制品实验时,常影响试验结果导致实验的失败,故绿脓杆菌已被列为无特定病原体小鼠必须排除的细菌之一。绿脓杆菌感染实验动物,给育种繁殖工作带来困难,绿脓杆菌对实验动物的危害应引起足够的重视

绿脓杆菌是SPF级小鼠必检项目, 主要定植于肠道内和粪便中。实验动物的细菌可以在特定的部位定植, 可在不同的培养基中生长, 有不同的菌落形态。与生化试剂有特殊的生化反应80年代为迅速测出SPF 小鼠体内是否被绿脓杆菌感染,曾经用噬菌体裂解试验

绿脓杆菌的检测目前多采用病原学的检测方法, 即通过分离培养、菌落形态特征和生化反应特征来确定动物体中是否感染病原菌这是目前较为可靠、直接的检测方法。该方法在实验动物细菌学检测中应用广泛, 也是主要的检测方法。但是, 该方法具有操作不便、工作量大等缺点。

新国标GB14922-2022中指出,绿脓杆菌的检测用GB14926的检测方法进行检测。国标GB14926中指出:“绿脓杆菌是革兰阴性杆菌,具有产生绿色色素和氧化酶等生化试验特征。因此,可利用选择性培养基培养、菌体检验和生化试验进行鉴定。”根据国标的内容,绿脓杆菌大部分菌落可产生绿色色素而致使培养基呈绿色。当被检菌为革兰阴性杆菌,氧化酶阳性及产生绿色色素,可报告检出绿杆菌。有时也需要结合一些生化反应来确认绿脓杆菌的感染。

当前分子生物学的PCR检测方法也是绿脓杆菌的重要检测方式,这种检测方法的优点是检测的灵敏度高,方便快捷,避免了菌株培养的繁琐流程和时间。一般6小时之内可以出检测结果。正是由于这种便捷性和灵敏度,越来越多实验者使用PCR方式进行绿脓杆菌的检测和阳性复检确认。

 

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