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近年来，工程化T细胞疗法在血液肿瘤中取得了突破性进展，但在实体瘤中的疗效仍然有限。

实体瘤为T细胞设置了多重障碍：T细胞首先需要有效浸润入肿瘤，而浸润肿瘤后又会受到缺氧、

酸性环境、代谢压力以及多种免疫抑制因子的共同作用，逐渐发生功能障碍和耗竭。

因此，如何系统寻找能够帮助T细胞克服这些障碍的遗传靶点，是提高实体瘤细胞治疗疗效的重要问题。

CRISPR筛选为此提供了强有力的工具，然而目前大规模筛选主要在体外进行，

难以同时重现实体瘤中的组织结构、细胞迁移、代谢压力和多种免疫抑制信号。

虽然直接在荷瘤动物体内筛选更接近真实微环境，

但长期受限于一个关键技术瓶颈——从实体瘤中能够回收的T细胞数量过少，

难以维持全基因组文库所需的覆盖度。

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