小柯机器人

以纳米抗体为纽带的转位法可在单细胞分辨率下进行多因素染色质分析
2022-12-21 20:46

美国纽约基因组中心Ivan Raimondi团队发现,以纳米抗体为纽带的转位法可在单细胞分辨率下进行多因素染色质分析。这一研究成果于2022年12月19日在线发表在国际学术期刊《自然—生物技术》上。

研究人员报道了纳米抗体拴住转位测序(NTT-seq),这是一种能够在单细胞分辨率下测量全基因组存在的多达三种组蛋白修饰和蛋白质-DNA结合位点的检测方法。NTT-seq使用重组的Tn5转座酶与一组二级纳米抗体(nb)融合。每个nb-Tn5融合蛋白都能与不同的免疫球蛋白-G抗体特异性结合,使结合不同表位的初级抗体的混合物能够用于单一实验。研究人员应用体细胞和单细胞NTT-seq来生成了细胞培养和人类免疫细胞中染色质状态的高分辨率多模态图。研究人员还扩展了NTT-seq,使细胞表面蛋白表达和多模态染色质状态的分析同时进行,可用于研究免疫系统的细胞。
 
据了解,染色质状态在功能上是由组蛋白修饰、转录因子结合、DNA可及性和其他因素的复杂组合来定义的。目前定义染色质状态的方法不能在单细胞分辨率下的单一实验中测量一个以上的方面。
 
附:英文原文

Title: Nanobody-tethered transposition enables multifactorial chromatin profiling at single-cell resolution

Author: Stuart, Tim, Hao, Stephanie, Zhang, Bingjie, Mekerishvili, Levan, Landau, Dan A., Maniatis, Silas, Satija, Rahul, Raimondi, Ivan

Issue&Volume: 2022-12-19

Abstract: Chromatin states are functionally defined by a complex combination of histone modifications, transcription factor binding, DNA accessibility and other factors. Current methods for defining chromatin states cannot measure more than one aspect in a single experiment at single-cell resolution. Here we introduce nanobody-tethered transposition followed by sequencing (NTT-seq), an assay capable of measuring the genome-wide presence of up to three histone modifications and protein–DNA binding sites at single-cell resolution. NTT-seq uses recombinant Tn5 transposase fused to a set of secondary nanobodies (nb). Each nb–Tn5 fusion protein specifically binds to different immunoglobulin-G antibodies, enabling a mixture of primary antibodies binding different epitopes to be used in a single experiment. We apply bulk-cell and single-cell NTT-seq to generate high-resolution multimodal maps of chromatin states in cell culture and in human immune cells. We also extend NTT-seq to enable simultaneous profiling of cell surface protein expression and multimodal chromatin states to study cells of the immune system.

DOI: 10.1038/s41587-022-01588-5

Source: https://www.nature.com/articles/s41587-022-01588-5

Nature Biotechnology:《自然—生物技术》,创刊于1996年。隶属于施普林格·自然出版集团,最新IF:68.164
官方网址:https://www.nature.com/nbt/
投稿链接:https://mts-nbt.nature.com/cgi-bin/main.plex


本期文章:《自然—生物技术》:Online/在线发表

分享到:

0