关于MAP和师妹的争论。

师妹： 一个反应需要一个引物。

炮灰：可以混合后检测，引物特异性好。至少COLD-PCR在测序之前并不能够名正言顺的说我扩出来的都是突变型。而且MAP可以肯定。

师妹：阳性对照难设。

炮灰：可以用组织的DNA。其实，并没有必要用一样的引物的。一次设一个即可。只要证明这个引物体系没有问题就OK了。BTW，师妹的PNA PCR只用了一种阳性对照，是不是也是有缺陷的呢？

师妹：基因组DNA庞大，并不需要如此高的特异性。

炮灰。。。。

但是，这其实是任何一种反应都不可避免的敏感性受限的问题。

我不知道师妹为啥反应如此巨大。但是，我确信她以前没有考虑过这个问题。就是由于DNA含量本身就很低，不可能仅仅通过PCR反应而把检出率提高。方法有两个：1 多次检测；2 靶序列富集。anyway，她不接受，是她的损失。预计不久的将来这个方法必然经过种种改进之后能够克服临床使用困难这个结论的。

BTW，两个师妹成天都在挑拨我和另一个反目，我不像从前那么蠢了。你们都已经失去了我的信任。。。

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