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透射及扫描电镜演示实验

已有 6631 次阅读 2010-2-24 22:23 |个人分类:生活点滴|系统分类:科研笔记

 

一、实验目的:

  1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能;

  2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序;

  3、了解电镜样品制备的配套设备。

  二、实验仪器及用品:

  透射电镜;扫描电镜;小白鼠肝脏超薄切片;酵母菌或乳酸杆菌的负染样品;喷好金膜的叶片及花粉样品

  三、方法步骤:

  (一)透射电镜操作规程:

  1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程,通过操作考试后才能正式上机操作。

  2、操作程序

  1)开机准备

  (1)    合上总电源闸刀,开启电子交流稳压器,电压指示应为220V。开启循环水,温度指示应为15-20℃。

  (2)    开启主机真空开关。

  (3)    约20分钟后,待高真空指示灯及照相室指示灯亮。

  2)工作程序

  (1)开启主机电源开关,待荧光屏显示操作数据后再进行下一步。

  (2)逐级加高压致所需电压,每加一级高压,必须等高压表中指示针停止摆动才能加下一级。如指示针移出量程,必须从最低移级加起。

  (4)    根据说明书要求进行合轴操作,使仪器处于最佳操作状态。

  (4)根据说明书的操作要求进行观察、换样和拍照。

  (5)作好实验记录及仪器使用记录。

  3)关机程序

  (1)关灯丝电流。

  (2)关高压。

  (3)关主机电源开关。

  (4)关真空开关。

  (5)    20分钟后,关循环水和电子交流稳压器开关。

  (6)    关闭总电源。

  (二)扫描电镜操作规程:

  1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程,通过操作考试后才能正式上机操作。

  2、操作程序

  1)开机准备

  (1)合上总电源闸刀,开启电子交流稳压器,电压指示应为220V。开启冷却循环水装置电源开关。

  (2)开启试样室真空开关(VACUUM POWER),开启试样室准备状态开头(STAND BY)。

  (3)开启控制柜电源开关(POWER).

  (4)约20分钟后,往试样室液氮冷井中加入液氮。

  2)工作程序

  (1)开启试样室进气阀控制开关(CHAMB VENT),将试样放入试样室后将试样室进气阀控制开关(CHAMB VENT)关闭抽真空。

  (2)开启镜筒真空隔阀。

  (3)加高压(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.

  (4)加灯丝电流(FILAMENT)至7.5-8.

  (5)调节显示器对比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至适当位置.

  (6)将图象选区开关拨至全屏(FULL).

  (7)调节聚焦旋钮(MEDIUM)和(FINE)至图象清晰。

  (8)选择适当的扫描速率(SCAN RATE)观察图象。

  (9)根据说明书的操作要求进行观察和拍照。

  (10)作好实验记录及仪器使用记录。

  3)关机程序

  (1)关灯丝电流(FILAMENT)。

  (2)关高压(ACCELERATION POTENTIAL)。

  (3)反时针调节显示器对比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.

  (4)关闭镜筒真空隔阀。

  (5)关主机电源开关。

  (6)关真空开关。

  (7)20分钟后,关循环水和电子交流稳压器开关。

  (8)关闭总电源。

  四、观察结果:

  1、小白鼠肝脏超薄切片:一般可见细胞膜、核膜、内质网、线粒体、肌纤维等结构。

  2、酵母菌或乳酸杆菌的负染样品:由于重金属盐在样品周围的堆积而使样品显示负的反差,从而衬托出样品的形态和大小。酵母菌近球型,有时可见出芽生殖;乳酸杆菌为杆状。

  3、叶片在扫描电镜下一般可见上表皮有各种纹饰,下表皮可见气孔器形态

  4、花粉在扫描电镜下一般可见表面的萌发沟和纹饰。

  观察过程中寻找典型部位进行拍照。



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