科学网—FlowJo的留言板

IP: 112.65.161.* [72]zs30193 2015-4-21 19:31

张老师：请帮我理解一下channel shift和mfi channel好吗？谢谢！

我的回复(2015-4-30 00:33)：需要一点语境哦。指的都是参数轴呢

IP: 114.212.204.* [71]immunofly 2015-4-19 11:14

张老师你好，请教一下histogram叠加时如何把默认的颜色区分变为线条类型区分。
谢谢！

我的回复(2015-4-20 23:34)：右击legend上的线条就可以更改了

IP: 218.94.21.* [70]JefferyCai 2015-3-19 10:39

张老师，可能我上次没描述清楚，AnnexinV和PI是可以区分早期凋亡的，但是晚期凋亡和坏死是不是都在右上角，双阳性区域，就没法区别晚期凋亡和坏死？
谢谢~

IP: 218.94.21.* [69]JefferyCai 2015-3-16 10:52

张老师你好，我想请教一下，用AnnexinV和PI双染可以区分坏死细胞和晚期凋亡细胞么？上次的问题，我还没找到合适的图片，等找到了发给您。谢谢！

我的回复(2015-3-17 11:48)：Annexin可以区分凋亡细胞。PI可以染死细胞

IP: 218.94.21.* [68]JefferyCai 2015-2-4 09:36

张老师你好，我想请教下，用Annexin V-FITC PI检测凋亡的时候，在BD Verse用PE 通道和PerCP通道都能检测到PI的信号，如果用PerCP检测的话跟FITC几乎没有补偿，但是为什么PE PerCP通道的荧光信号强度不一样？检测出的凋亡比例就不一样，但是趋势差不多，我应该选哪个呢？谢谢~

我的回复(2015-2-12 00:19)：你好！
因为荧光素的不同，染色的荧光强度会有所不同。percp如果染色信号理想的话是一个不错的选择。不过你提到百分比也不同，有显著性差异吗？你也可以发比较图片过来我看看。

IP: 218.94.21.* [67]JefferyCai 2015-1-29 15:49

张老师你好，我想请教一下什么是火箭峰？双色十字象限画门的时候，LL的比例要占多少合适？谢谢~

我的回复(2015-2-4 03:03)：这个比例不应该是固定的，要看你实际的细胞群分布及实验对照来设门

IP: 58.60.63.* [66]hsd89700 2015-1-29 12:50

张老师，你好，我最做了流式数据分析，不会分析数据，我用flowjo分析，遇到几个问题，帮忙解答一下：1.所有数据都要统一批次处理吗？2.流式画十字门是随意画的，所有统一批次样品都要统一十字门不？

我的回复(2015-3-11 23:59)：数据可以分批分析，但是画门不是随意画的。要有对照

IP: 114.111.167.* [65]liguiyun 2015-1-7 23:27

张老师，您好，我看了很多FlowJo软件分析周期和凋亡的资料，但是实际操作中就发现软件中的横纵参数和您博客中将的显示不一样，这样我改如何选择？

我的回复(2015-1-10 07:15)：可能是版本的不同的原因。你可以到flowjo QQ技术群提问，我们的技术人员会帮助你的。谢谢

IP: 114.251.216.* [64]guoqirui56789 2015-1-7 00:36

您好，flowjo中能不能显示阳性细胞在原始群中的位置？只想显示子细胞中阳性的部分，不是所有的子细胞。

IP: 114.251.216.* [63]guoqirui56789 2015-1-7 00:33

老师您好，flowjo7.6软件在biex轴图形中gate的数据怎么不对呢？原来30%的比例变成了5%，把biex轴切换成log坐标轴后发现gate中的细胞很少。是不是需要现在log轴的图形中先画好gate才能切换为biex轴？急！急！急！

IP: 123.116.211.* [62]zxp406 2015-1-6 21:48

张老师，您好，请问流式获取数据时，PMT电压对结果是否有影响，对补偿有何影响？

IP: 180.169.137.* [61]byzhangyumei 2014-12-29 00:46

张老师，您好，我安装了flowjo的7.5版本，但是调节补偿的时候，补偿编辑器界面没有补偿这一选项，无法添加到组；再就是调节补偿的时候无法把工作界面的单标的阴性和阳性拖到补偿编辑器中，在工作界面中选择单标，补偿编辑器的界面就会消失，不能同时存在，无法拖过去，是不是我安装的软件有问题呢？谢谢

我的回复(2014-12-30 01:48)：你可以添加我们技术的QQ来解决：QQ 287389458

IP: 115.155.71.* [60]ld217 2014-12-25 21:52

张老师，您好，我看了您的关于用Flowjo分析细胞周期的微博，到第二步选择坐标轴的时候，（X轴选择FL3-LIN,用来表示PI的线性信号。Y轴选择FL3-PEAK,用来表示PI的峰值信号。本实验数据采集采用的是贝克曼仪器采集的数据。（如果是BD的仪器采集的数据，X轴选择FL2-W,用来表示PI的宽度信号。Y轴选择FL2-A,用来表示PI的面积信号），如上图所示多倍体或异倍体细胞不予分析。）可是我的软件里面都没有这些选项，只有PE-W，comp-PE-A；FITC-A等选项，请问怎么办？

IP: 222.181.164.* [59]张莉 2014-12-9 14:26

张老师您好，我下载了您说的第一个FlowJo软件，但是安装后怎么注册呀？

我的回复(2014-12-11 09:57)：http://www.flowjochina.com/content/30daytrial
按照这里的说明申请30天免费。

IP: 124.16.220.* [58]zhangmengxin 2014-11-28 18:03

张老师，您好：
我用流式做了两个样品的荧光直方图，但由于两个样品P1门的细胞数量不同，如果直接把直方图放在一起，一个count高，图瘦高，一个count低，图矮胖，不好看。所以我想把两张图归一化，都变为百分比，但是不知道如何做，请张老师指点！我搜索了很多资料，都没有找到方法。谢谢

我的回复(2014-11-29 15:03)：可以直接在flowJo里面将他们拖放重叠在一个图片之后，将Y轴选择百分比即可。我的博客上有好几篇文章是讲到这个的，你可以搜索一下

IP: 114.249.71.* [57]fangdifeng 2014-11-26 20:10

张老师，您好，我在用flowjo 10的时候将散点图的坐标改为Biex，发现无法显示小于0的点（全挤在0这条线上），是不是因为我的原文件格式是FSC2.0的原因？谢谢！

我的回复(2014-11-27 08:13)：是的，如果你不能对数据进行biexpo的操作，很可能是数据格式的原因，你可以打开数据属性查看

IP: 14.23.136.* [56]陈万群 2014-11-19 09:37

您好，张老师，我从同学那里得到一个flowjo软件包，不需安装直接使用，但是很多原文件打不开，一打开就会弹出would you like to send a bug report对话框。请问这个软件是否不能使用，我如何才能获得功能完全的flowjo分析软件，谢谢您！

我的回复(2014-11-19 14:51)：那可能只能买正版的了。和老板申请一下

IP: 140.207.47.* [55]Austerlitz 2014-11-14 15:54

张老师你好，请教您一个问题，在做PBMC流式检测的时候，我的空白对照和同型对照在APC通道上出现了2个峰，可能是什么原因呢？gate圈的是淋巴细胞和单核细胞，会不会是两种不同细胞群的自发荧光不同造成的？但是FITC和PE通道没有这样的现象，重复多次实验都是这样

我的回复(2014-11-15 02:11)：你可以将数据发给我帮你看看

IP: 60.28.141.* [54]胡甜园 2014-11-13 09:13

还有一个问题想请教：请问怎么求MFI，例如测ROS的时候需要算曲线覆盖面积。

我的回复(2014-11-13 12:36)：MFI 请搜索我博文的内容，有几篇里有详细介绍。你所说的曲线面积是指什么？

IP: 60.28.141.* [53]胡甜园 2014-11-12 23:34

你好 windows版的flowjo有一个调节补偿的面板里面可以直接设置补偿百分比（而不用设置单阳管之类的），请问在flowjo for mac 版本中这个功能在哪里？怎么用？能讲一下吗？

我的回复(2014-11-13 00:20)：页面下方有mac的补偿操作视频。mac里面也可以修改补偿矩阵，但是这个功能不是让用户在没有单染管的情况下，自己调整的，这将导致数据不准确。做补偿还是务必要用单染管。
http://www.flowjochina.com/content/tutorial-video

我最近刚刚发布了一篇有关补偿的博文，你稍微看看。

FlowJo中文技术博客分享 http://blog.sciencenet.cn/u/FlowJo 流式细胞技术相关资源分享，流式细胞数据分析，流式技术支持及培训

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张千君