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4. 狂犬病免疫反应的检测
本章目录
4.1 依据目的选择检测方法
4.2 检测病毒中和活性(RFFIT、FAVN、MNT)
4.3 结合实验(ELISA)
4.4 检测细胞免疫反应
4.2 检测病毒中和活性(RFFIT、FAVN、MNT)
病毒中和活性检测是测定狂犬病毒抗体的最广泛使用的方法。病毒中和抗体(VNA) 不仅对针对病毒的免疫负责,血清中VNA的存在也被认为是疫苗接种后产生了主动免疫的可靠指标。
快速荧光灶抑制试验(RFFIT)和荧光抗体病毒中和试验(FAVN)都是体外病毒中和试验。在良好实验室规范(GLP)下,RFFIT和FAVN测试是等效的,两者都被认为是精确测量VNA的最有效方法。
最初采用的狂犬病毒中和试验是小鼠中和试验(MNT),这是一种在体内测量VNA的方法,目前仍然被用于一些缺乏体外试验能力的实验室。只要有可能,这种方法就应该被替代方法所取代。所有这三种病毒中和试验方法都已在其他地方发表。
在1978年,世界卫生组织/国际生物标准化协会(IABS)研讨会上确定了0.5 IU / mL的RVNA(狂犬病毒中和抗体)阈值,作为在系列接种完成后4周使用MNT和RFFIT方法可证明已发生血清转换的最低水平。研究表明, 0.1 IU / mL对猫就能提供保护,0.2 IU / mL对狗就能提供保护,因此0.5 IU / mL是一个保守的RVNA阈值,用于说明用病毒中和方法检测抗体的固有变异性。这也是OIE(世界动物卫生组织)认可的水平,作为对狗和猫合格的疫苗反应的确认。
病毒中和检测是一种有用的工具,可以证实专门针对狂犬病毒中和表位的抗体的存在。但这些测试也非常复杂,必须在高度封闭的设施中由有经验的人员进行。诊断实验室必须能开展这些类型的VNA检测中的一种或两种,才有资格参与一个已建立的质量保证协作项目,包括参加定期的技术能力考评。
参考文献:
World Health Organization. (2017). The immunological basis for immunization series: module 17: rabies. World Health Organization.
https://apps.who.int/iris/handle/10665/259511. License: CC BY-NC-SA 3.0 IGO
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