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水与乙醇提取植物可溶性糖和淀粉有什么区别?

已有 18939 次阅读 2009-2-14 21:03 |个人分类:学术点滴|系统分类:科研笔记

1.植物可溶性糖和淀粉的提取:(我采用的是苯酚-硫酸法测定,可溶性糖用水做提取液,提取过程如下:干材料,放入刻度试管中,加入5~10ml蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25ml容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度;而淀粉提取过程如下:将提取可溶性糖以后的残渣,移入50ml容量瓶中,加20ml热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸15min,再加入9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷却后,混匀,用滤纸过滤,并用蒸馏水定容(或以2500r/min离心10min))

但是文献也有用乙醇提取的步骤,可溶性糖的提取:将植物样品材料在105 ℃迅速杀死, 于80 ℃烘干至恒重, 磨碎后称取0.1g样品, 加入80%乙醇10 ml, 于沸水浴中提取10min, 然后4 000 r·min–1离心10 min, 收集上清液于50 ml容量瓶中, 反复3次, 合并上清液, 定容,即为可溶性糖提取液;淀粉的提取:用上述离心后的沉淀物测定植物样品中的淀粉含量。沉淀物加入30% (v/v) 的高氯酸10 ml, 静置过夜,然后于80 ℃水浴中继续准确提取10 min, 冷却,4 000 r·min–1离心10 min, 取上清液定容到50 ml的容量瓶。

我按照上述两种方法(用水和80%乙醇提取),然后用苯酚硫酸法测定可溶性糖和淀粉,结果NSC都比较接近,但是可溶性糖和淀粉比例不一样,水提取方法测得的可溶性糖比用乙醇提取的低,相反淀粉比用乙醇提取的高,这是为什么呢?难道用水提取可溶性糖,会不会导致提取可溶性糖不完全,造成可溶性糖含量测定偏低,间接导致淀粉含量测定偏高呢?是否用80%的乙醇进行提取会更好?用乙醇和水提取会有什么差别呢?

另外请问苯酚硫酸法测定与蒽酮法测定植物可溶性糖和淀粉有什么区别?


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