1.操作步骤

1.1.在灭菌的洁净载玻片上加一小滴灭菌的超纯水，大约2μL；

1.2.用线虫针将单条线虫挑入水滴中；

1.3.用锋利的手术刀将线虫体壁轻轻划破，内含物溢出；

1.4.向水滴中加入7μL的灭菌的超纯水，同时连同线虫内含物8μL混合液转移到200μL的PCR管中，同时加入2μL的5х裂解buffer（10X的PCR buffer与1000μg/mL的蛋白酶K按1∶1的体积比混合）；

1.5.将PCR管转移到-20℃冰箱中，冷冻30min.；

1.6.将冷冻后的PCR管放置到PCR仪中，65℃ 1h,95℃ 10min.；

1.7.掌上离心机瞬时离心后上清液即可用于PCR扩增，或放置在-20℃冰箱中备用。

2.适用范围

2.1根据南农线虫实验室和天津出入境检验检疫局线虫实验室2002年以来的试验数据，该方法适用于所有单条植物线虫DNA的微量提取。

2.2应该适用于昆虫等动物细胞的微量DNA提取。

2.3微量提取的DNA适用于核糖体ITS、IGS等串联重复序列的PCR扩增。

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