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肿瘤标志物筛查新方法

已有 3528 次阅读 2016-4-11 15:59 |个人分类:《科学通报》|系统分类:论文交流| 肿瘤, 标志物

恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康,而肿瘤标志物的筛查可以对其进行早期诊断和术后控制。为此,科学家们不遗余力地开发出很多肿瘤标志物筛查的新技术和新方法。

《科学通报》2016年第61卷第4-5期发表名为终端等重同位素标记串级质谱定量技术:高通量、高准确度的肿瘤标志物筛查新方法”的进展文章,综述了终端等重标记方法的最新发展,通讯作者为复旦大学陆豪杰教授。

文章指出,理想的生物标志物需要具备良好的灵敏度和特异性,并且可以适用于多国家和地区人群的普查。而终端等重标记的方法通过对肽段的N末端和C末端进行互补的同位素标记,产生等重标记的肽段,克服了一级质谱质量差异定量方法的复杂度高和灵敏度低的缺陷。全质量范围内多对碎片离子的定量大大增加了定量的准确性。同时,利用碎片离子成对的特征可以排除质谱噪音和干扰信号的影响,为肿瘤标志物的筛查提供了有力保障。目前终端等重标记的方法主要建立在化学标记、代谢标记及混合标记的基础上。其中最为经济的方法是邹汉法课题组提出的pH调控的位点特异性二甲基化等重标记方法,它通过调整溶液的pH值即可凭借一步反应达到等重标记的目的。张丽华课题组基于二甲基化反应开发的PIDL方法是目前通量最高的方法。

陆豪杰教授课题组主要着眼于代谢标记及混合标记方法的开发,并取得一系列科研成果。基于代谢标记是系统操作误差最小的同位素定量方法的理念,该课题组将其引入终端标记串级质谱定量中,相继建立了IVTALG-IVTAL方法IVTAL方法原理如图1所示,通过细胞培养过程中的体内标记和两步酶切实现了等重标记, 操作步骤少, 准确度高。G-IVTAL在此基础上引入二甲基化标记反应,以避免复杂的酶解步骤,大大提高了定性和定量数据的规模,并成功定量分析了人肝癌细胞株HePG2。为了进一步扩大此类方法的普适性,该课题组又开发了基于胰蛋白酶酶解的18O结合二甲基标记的二级质谱定量方法(QITL),并可以应用到组织、细胞、体液等多种样本中,更加适用于肿瘤标志物的筛查。

1 IVTAL实验原理示意图

终端等重标记串级定量方法满足了肿瘤标志物筛查过程的高灵敏度、高准确性和高通量的需求,为肿瘤标志物的筛查提供了有力支持。

研究得到以下资助:国家重点基础研究发展计划(2012CB910602)、国家自然科学基金(21335002, 21105015)、高等学校博士学科点专项科研基金(20130071110034)和上海市东方学者项目。


更多详情请阅原文:

王丽蒙, 谢力琦, 陆豪杰. 终端等重同位素标记串级质谱定量技术:高通量、高准确度的肿瘤标志物筛查新方法. 科学通报, 2016, 61(4-5): 432-441.

http://csb.scichina.com:8080/CN/Y2016/V61/I4-5/432



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