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如何确定流式分析中荧光补偿是正确的呢?

已有 18352 次阅读 2010-1-4 06:12 |个人分类:流式知识|系统分类:论文交流| 荧光补偿

How to determine the correct compensation during your Flow Cytometry data analysis?

The principle:

the median of the positives population is equal to the median of the negatives population.

也就是说要确定你的阳性细胞群和阴性细胞群的中位数要一致。背后的机理请看我的前一篇文章,荧光补偿基础知识

具体参见下图,
细胞染了CD3 FITC, 和 PE isotype. 水平的黑线表示细胞群的中位数中心。
figure 1 显示了,各种可能的补偿情况,你能知道那一个图是正确补偿的吗?


Figure 1.

只有 阳性细胞群中位数阴性细胞群中位数 才是正确的补偿(必须要是单染的细胞样品)
Figure 2.

under compensated: 补偿不足, 既没有将所有的溢漏荧光减去,只补偿了一部分。
Over compensated: 过渡补偿,既矫正过渡。


警告: 肉眼补偿是非常危险的,很容易造成上述2种情况,一定要计算细胞群的中位数。

references: http://www.drmr.com/compensation/index.html

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