doudouEunice的个人博客分享 http://blog.sciencenet.cn/u/doudouEunice

博文

汉坦病毒荧光定量PCR检测方案

已有 137 次阅读 2026-3-9 22:00 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

 

1951-1953年3000多名士兵感染了一种急性发热同时伴肾功能衰竭以致休克的疾病,该病发生于汉坦河流域,因此以“汉坦”命名。直到1976年,韩国李镐汪从黑线姬鼠的肺组织中分离出了汉坦病毒。

汉坦病毒(Hantavirus, HV)属于布尼亚病毒科家族,是有包膜分节段的单股负链RNA病毒。病毒颗粒多数呈圆形或卵圆形,直径大小为为80~120nm。汉坦病毒的基因组由三个基因片段组成,分别是小(S)、中(M)和大(L) 3个片段,每个片段分别编码病毒的核衣壳蛋白(NP)、糖蛋白(GP)的G1和G2、RNA聚合酶。正汉坦病毒属可感染人类并致病。宿主啮齿动物(鼠、田鼠、棉鼠等)可感染人类,引发肾综合征出血热(HFRS)与汉坦病毒肺综合征(HPS)感染人类病毒代表种:汉滩病毒(HTNV)、汉城病毒(SEOV)等。

汉坦病毒的PCR 检测是RT - PCR(逆转录 PCR),包括普通 RT - PCR、实时荧光 RT - PCRRT - PCR:先以逆转录酶将病毒 RNA 反转录为 cDNA,再用引物扩增汉坦病毒片段,通过电泳判读产物。实时荧光 RT - PCR:在 RT - PCR 体系中加入TaqMan 探针扩增时荧光信号累积,通过Ct 值定量定性判断。

翼和生物汉坦病毒HANT、小鼠肺炎病毒PVM、小鼠细 小病毒MVM多重qPCR鉴别试剂盒,在必检病毒联检试剂盒 的基础上设计,用于对检出的阳性样本进一步确认所感染的病毒。

试剂盒采用多套引物探针,在FAM(汉坦病毒HANT),HEX(小鼠肺炎病毒PVM),ROX(小鼠细小病毒MVM)三个通道检测3种病毒,另外一套引物探针在CY5通道检测内参RNA。该试剂盒具有以下特点:

灵敏:检测灵敏度较高,10 copies/μL可被有效检出。

稳定:全程闭管操作,无交叉污染。

可靠:含内参基因,避免假阴性。

方便:操作简单,一步法检测。

 

 

 

 



https://wap.sciencenet.cn/blog-3140696-1525091.html

上一篇:数字PCR如何助力甲基化的液体活检?
收藏 IP: 183.193.27.*| 热度|

0

该博文允许注册用户评论 请点击登录 评论 (0 个评论)

数据加载中...

Archiver|手机版|科学网 ( 京ICP备07017567号-12 )

GMT+8, 2026-3-10 07:07

Powered by ScienceNet.cn

Copyright © 2007- 中国科学报社

返回顶部