ABDP 493/503是一种非常实用的中性脂滴荧光探针，它因其高选择性、良好的光稳定性和对pH不敏感的特性，成为脂代谢研究中的重要工具。

化学性质

• 化学名称：4,4-二氟-1,3,5,7,8-五甲基-4-硼-3a,4a-二氮杂-s-吲哚烯 (4,4-Difluoro-1,3,5,7,8-pentamethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene)。

• CAS号：121207-31-6。

• 分子式：C₁₄H₁₇BF₂N₂。

• 分子量：262.1 g/mol。

• 纯度：99%

• 厂商：AbMole

• 外观与溶解性：通常为固体粉末。易溶于DMSO（例如可达19.08 mM），在水溶液中溶解度较低。配置溶液时可能需要加热和超声处理以助溶。

• 光谱性质：最大激发波长 493 nm，最大发射波长 503 nm，发出明亮的绿色荧光。

• 稳定性与储存：固体粉末应在-20°C下避光保存，以避免荧光淬灭。配制成溶液后，建议分装冻存，并避免反复冻融。

原理机制

ABDP 493/503是一种亲脂性荧光染料。其工作原理基于其自身的疏水特性，能够轻松穿过细胞膜，并特异性富集在细胞内的中性脂质中，主要是脂滴（Lipid Droplets）疏水的核心区域。

当染料进入脂滴的疏水环境后，其荧光强度会显著增强。因此，在荧光显微镜下，可以看到脂滴发出明亮的绿色荧光。与尼罗红（Nile Red）等其他亲脂性染料相比，ABDP 493/503对环境的极性和pH值相对不敏感，在不同生理条件下能保持稳定的荧光特性，因此具有更高的选择性。

实验应用

脂滴标记与成像：可用于活细胞或固定细胞的脂滴标记，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜、双光子显微镜等多种成像平台。它可以清晰显示脂滴的大小、数量和分布。

流式细胞术分析：结合流式细胞术，能够对细胞群体中脂滴的含量进行定量分析，用于研究细胞脂质代谢状态或分选特定类型的细胞。

肝脂肪变性研究：在肝脏研究中，该探针被用于评估高脂肪饮食诱导的肝脂肪变性动物模型，帮助区分微泡性和大泡性脂肪变性，为肝病研究提供重要工具。

脂滴动态过程研究：凭借其良好的光稳定性和细胞相容性，ABDP 493/503还可用于研究活细胞中脂滴的形成、融合以及与其他细胞器的相互作用等动态过程。

使用建议与注意事项

工作液配置：通常先用DMSO配制1-5 mM的储存液，使用时再用适当的缓冲液（如PBS或无血清培养基）稀释成1-5 μM的工作液。工作液建议现配现用。

染色步骤：对于贴壁细胞，弃去培养基后用PBS清洗，加入染料工作液覆盖细胞，37°C避光孵育5-30分钟。随后去除染料工作液，用预温的培养液或PBS清洗细胞2-3次后即可观察。

设置对照：建议设置阳性对照（例如用油酸处理细胞以诱导脂滴生成）以确保染色效果。

避光操作：所有操作步骤应尽量避光进行，以减缓荧光淬灭。

图像采集：使用FITC或GFP的滤光片设置进行图像采集。

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