一、产品简介：

S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。本产品采用3,5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵、天平、可调式移液器、30-50目筛、甲苯（>98%，AR）和蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；

2、标准溶液的配制：把10mg/mL标准品母液用蒸馏水稀释成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 mg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将上清液用蒸馏水适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当延长反应时间（T）后再进行测定，并将改变后的T和D代入公式计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（mg/mL）。

2、S-CL活力计算：

单位定义：每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活性单位（U）。

S-CL 酶活（U/g 土样）=x×V ÷W÷T×D =144×x×D

T：反应时间，1h=1/24d；           V ：反应体系总体积，0.3mL；

D：稀释倍数，未稀释即为1；       W：样本质量，0.05g。