博文

Nirogacestat 是一种可逆的、口服生物利用的、非竞争性的、选择性的 γ-分泌酶抑制剂 |MCE

已有 256 次阅读 2024-9-24 10:06 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：Nirogacestat

CAS：1290543-63-3

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Nirogacestat (PF-3084014) 是一种可逆的、口服生物利用的、非竞争性的、选择性的 γ-分泌酶 抑制剂，IC₅₀ 为 6.2 nM。 Nirogacestat 抑制 Notch 信号，同时最大限度地减少胃肠道毒性，为研究 Notch 受体依赖性癌症提供了一种很有前途的方法^[1]。 IC50 和目标：IC50：6.2 nM（γ-分泌酶）^[1]

体外：Nirogacestat (PF-03084014) 在使用源自 HeLa 细胞的洗涤剂溶解膜进行 Aβ 生产的无细胞测定中抑制 γ-分泌酶的 IC₅₀ 确定为 6.2 nM。当使用在 Notch1 的异二聚化和 PEST 结构域中都存在突变的 HPB-ALL 细胞在细胞测定中测试 Notch 受体裂解的抑制时，细胞 IC₅₀ 确定为 13.3 nM。 Nirogacestat (PF-03084014) 导致 HPB-ALL 和 TALL-1 细胞中的 caspase-3 活性显着增加，并在 7 天处理后诱导裂解的 PARP 和裂解的 caspase-3^{[1]< /sup>。}

体内：Nirogacestat (PF-03084014) 在该模型中显示出强大的抗肿瘤活性，为期 14 天，每天两次给药。肿瘤生长抑制具有剂量依赖性，在高剂量水平 (150 mg/kg) 下可获得约 92% 的最大肿瘤生长抑制。在小鼠接受每天两次重复给药超过一周的肿瘤生长抑制研究中，Nirogacestat (PF-03084014) 在低于 100 mg/kg 的剂量水平下具有良好的耐受性，因为没有观察到显着的体重减轻、发病率或死亡率。然而，当剂量增加到 150 mg/kg 时，小鼠在化合物给药后约 10 天出现腹泻并显示体重减轻 (10-15%)。如果给予给药假期，治疗动物的体重通常会恢复正常，这表明 Nirogacestat (PF-03084014) 的毒性是可逆的^[1]。

细胞试验：将细胞以 2,000 个（Sup-T1、Jurkat 和 DND-41）或 10,000 个（HPB-ALL 或 TALL-1）细胞/孔接种在 96 孔板中，生长培养基中补充有 10% 胎牛血清。 Nirogacestat (PF-03084014) 在 DMSO 中进行连续稀释，向每个孔中添加适当的对照或指定浓度的 Nirogacestat (PF-03084014)，并将细胞在 37°C 下孵育 7 天（最终 DMSO 含量 0.1%）。将终浓度为 0.1 mg/mL 的刃天青添加到细胞中，并将板孵育 2 至 4 小时。荧光信号读取为 560 nm 激发后 590 nm 处的发射。 IC50 值是通过使用 GraphPad Prism[1] 中的 S 形剂量响应（可变斜率）计算的。

动物体内实验:小鼠[1] 使用无胸腺雌性小鼠（nu/nu，6-8周）。为了获得抗肿瘤功效，将携带大小为 150 至 300 mm3 的肿瘤的动物随机分为接受媒介物（0.5% 甲基纤维素）或 Nirogacestat (PF-03084014)（150 mg/kg，在媒介物中稀释）的组，并通过口服给药灌胃。每 2 至 3 天测量一次动物体重和肿瘤。用游标卡尺测量并计算肿瘤体积(mm3)。在研究的最后一天测量药物治疗的小鼠与媒介物治疗的小鼠相比的抑制百分比(%)并计算。对于所有肿瘤生长抑制实验，每个剂量组使用 8 至 10 只小鼠。学生 t 检验用于确定 P 值。

研究领域：Neuronal Signaling | Stem Cell/Wnt | Apoptosis

作用靶点：γ-secretase | Apoptosis

参考文献：[1]. Wei P, et al. Evaluation of selective gamma-secretase inhibitor PF-03084014 for its antitumor efficacy and gastrointestinal safety to guide optimal clinical trial design. Mol Cancer Ther. 2010 Jun;9(6):1618-28.