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Cyclopamine 是一种 Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂 |MedChemExpress (MCE)

已有 273 次阅读 2024-9-20 09:34 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：Cyclopamine

中文名：环巴胺

CAS：4449-51-8

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Cyclopamine 是一种 Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂，在 Hh 细胞试验中的 IC₅₀ 为 46 nM。 Cyclopamine 也是一种选择性 Smo 抑制剂。 IC50 和目标：IC50：46 nM（Hedgehog，在 Hh 细胞试验中）^[1]

体外：使用小分子 Hh 抑制剂（如 HhAntag 和天然产物环巴胺）治疗，两者均与 Smo 结合，在髓母细胞瘤基因小鼠模型中诱导肿瘤缓解^[1]。 Cyclopamine 是一种 Hedgehog (Hh) 通路拮抗剂。环巴胺抑制细胞生长。 Cyclopamine (3 μM) 抑制消化道肿瘤细胞系中 Hh 通路的活性和生长与 PTCH mRNA^[2] 的表达相关。 Cyclopamine 是一种甾体生物碱，可通过与 Smo^[3] 的直接相互作用抑制 Hh 信号传导。

体内：Cyclopamine 导致异种移植肿瘤持久消退。 Cyclopamine 处理的动物体内的肿瘤在 12 天后完全消退^[2]。 Cyclopamine (1.2 mg) 治疗可阻断移植到裸鼠体内的人胰腺癌细胞的肿瘤形成^[3]。

细胞试验：将细胞在 96 孔板中的测定培养基中一式三份培养，在 0 小时以正文中所示的浓度向其中添加 5E1 单克隆抗体、ShhNp 和/或环杷明 (3 μM)。使用 CellTiter96 比色测定法在第 2 天和第 4 天在 490 nm (OD490) 处测量光密度来确定活细胞质量。相对生长的计算方式为 OD（第 4 天）-OD（第 2 天）/OD（第 2 天）[2]。

动物体内实验:小鼠[3] 将总共0.1 mL Hanks'平衡盐溶液和含有2×106个细胞的基质胶（1:1）皮下注射到CD-1裸鼠体内。肿瘤生长 4 天至最小体积 125 mm3；所有受试者同时开始治疗。每天向小鼠皮下注射单独的载体（三油酸甘油酯：乙醇 4:1 v/v）或环杷明悬浮液（每只小鼠 1.2 毫克三油酸甘油酯：乙醇 4:1 v/v），持续 7 天。治疗期结束时，从小鼠身上切除肿瘤，称重，然后用 4% 多聚甲醛在 4°C 下固定 3 小时，包埋在石蜡中并切片（6 µm）。使用重组 Tdt 通过 TUNEL 鉴定凋亡细胞。然后用伊红对切片进行复染。随机选择来自对应于两个对照和两个环杷明治疗的肿瘤的外部、中部和内部的区域的八个×20放大视野。我们手动计数 TUNEL 阳性细胞核的数量。进行苏木精/伊红染色。

研究领域：Stem Cell/Wnt | Metabolic Enzyme/Protease

作用靶点：Hedgehog | Smo | Endogenous Metabolite

参考文献：[1]. Qi Wan, et al. Overexpression of Laminin α4 Facilitates Proliferation and Migration of Fibroblasts in Knee Arthrofibrosis by Targeting Canonical Shh/Gli1 Signaling. Connect Tissue Res. 2020 May 24.

[2]. Berman DM, et al. Widespread requirement for Hedgehog ligand stimulation in growth of digestive tract tumours. Nature, 2003, 425(6960), 846-851.

[3]. Peukert S, et al. Identification and structure-activity relationships of ortho-biphenyl carboxamides as potent Smoothened antagonists inhibiting the Hedgehog signaling pathway. Bioorg Med Chem Lett, 2009, 19(2), 328-331.

[4]. Thayer SP, et al. Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis. Nature, 2003, 425(6960), 851-856.

[5]. Ma W, et al. Reduced Smoothened level rescued Aβ-induced memory deficits and neuronal inflammation in animal models of Alzheimer's disease. J Genet Genomics. 2018 May 20;45(5):237-246.