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Enzalutamide (MDV3100) 是一种雄激素受体 (AR) 拮抗剂 |MCE

已有 562 次阅读 2024-9-13 17:23 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：Enzalutamide

中文名：恩杂鲁胺

CAS：915087-33-1

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Enzalutamide (MDV3100) 是一种雄激素受体 (AR) 拮抗剂，在 LNCaP 前列腺细胞中的 IC₅₀ 为 36 nM。 Enzalutamide 是一种自噬激活剂^[1]^[2]。 IC50 和目标：IC50：36 nM（雄激素受体，在 LNCaP 细胞中）^[1]

体外：在抗去势 LNCaP/AR 细胞中与 16β-[¹⁸F]fluoro-5α-DHT (18-FDHT) 的竞争试验中，Enzalutamide (MDV3100) 对 AR 的亲和力高于 ICI 176334（ AR-过度表达）。而 Enzalutamide 对 LNCaP/AR 前列腺细胞没有显示出激动作用。 Enzalutamide 与亲本 LNCaP 细胞中的合成雄激素 R1881 结合，拮抗前列腺特异性抗原 (PSA) 和跨膜丝氨酸蛋白酶 2 (TMPRSS2) 的诱导。 Enzalutamide 抑制突变 AR 蛋白（W741C，Trp741 突变为 Cys）的转录活性^[1]。Enzalutamide 还可以防止配体-受体复合物的核Enzalutamide (MDV3100) 是一种雄激素受体 (AR) 拮抗剂转位和共激活因子募集^[2]。

体内：Enzalutamide (MDV3100) 以 10 mg/kg^[1] 的剂量诱导携带 LNCaP/AR 异种移植物的阉割雄性小鼠的肿瘤显着消退。Enzalutamide 在静脉和口服剂量为 0.5-5 mg/kg 时表现出与剂量无关的药代动力学^[4]。

细胞试验：LNCaP 细胞（107 个细胞/条件）在补充有 5% 活性炭去除血清的 RPMI 培养基中生长 22 天，然后用 DMSO 或 1 nM R1881 结合抗雄激素（DMSO、1 μM ICI 176334、10 μM ICI 176334、1 μM RD162、10 μM RD162、1 μM MDV3100 或 10 μM MDV3100) 8 小时。收获等份细胞用于 PSA 和 TMPRSS2 mRNA 的 qRT-PCR。剩余的细胞使用 1% 多聚甲醛交联 10 分钟，然后添加甘氨酸并将样品离心（4°C，4000 rpm，5 分钟）以停止进一步交联。使用染色质免疫沉淀检测试剂盒进行染色质免疫沉淀。通过实时 PCR 扩增免疫沉淀 DNA。引物是 PSA 增强子正向-ATGTTCACATTAGTACACCTTGCC 和反向-TCTCAGATCCAGGCTTGCTTACTGTC 和 TMPRSS2 增强子正向-TGGTCCTGGATGATAAAAAAAGTTT 和反向-GACATACGCCCCACAACAGA[1]。

动物体内实验:小鼠[3] 经过 5 天的适应期后，5 至 9 周龄的雄性 CB17SCID 小鼠被阉割，并在接种肿瘤细胞之前再恢复 5 天。共表达外源 AR 和 AR 依赖性报告基因构建体 ARR2-Pb-Luc（LNCaP-AR-Lux 细胞）的 LNCaP 细胞用于生成人类前列腺癌的异种移植模型。植入前，通过添加胰蛋白酶-EDTA制备LNCaP-AR-Lux细胞，用完全培养基洗涤，收集并以20×106细胞/mL重悬。将细胞悬液用基质胶稀释至 2×106 个细胞/0.2 mL，并皮下递送至肩胛上区域。当治疗开始时（80 天），监测肿瘤生长至 100 mm3 的体积。观察到LNCaP-AR-Lux细胞的肿瘤摄取率在70%至80%之间。每周用数显卡尺测量体重和肿瘤体积(宽度2×长度/2)2至3次，并确定平均肿瘤体积。测试药物在 Tween 80:PEG 400 中稀释，并保存在 4°C 下直至口服强饲给药。每组小鼠 (n = 7) 每天用 1、10 或 50 mg/kg Enzalutamide、载体对照或 50 mg/kg ICI 176334 治疗，连续 28 天。在治疗期结束时或当肿瘤体积增大时超过 1,000 mm3，对动物实施安乐死，并收集血液和组织样本进行分析。大鼠[4] 雄性SD大鼠（n=3）通过尾静脉（静脉内）和口服强饲法以1mg/kg施用恩杂鲁胺，并在给药后饲养在代谢笼中。给药后在以下时间间隔收集尿液和粪便样本：0-2、2-4、4-6、6-10、10-24、24-48和48-72小时。用蒸馏水冲洗代谢笼，并将残留物添加到72小时的尿样中。为了提取粪便中存在的恩杂鲁胺，将样品与 50% 甲醇一起剧烈摇晃 12 小时。

研究领域：Vitamin D Related/Nuclear Receptor | Autophagy

作用靶点：Androgen Receptor | Autophagy

参考文献：[1]. Tran C, et al. Development of a second-generation antiandrogen for treatment of advanced prostate cancer. Science, 2009, 324 (5928), 787-790.

[2]. Scher HI, et al. Antitumour activity of MDV3100 in castration-resistant prostate cancer: a phase 1-2 study. Lancet, 2010, 375(9724), 1437-1446.

[3]. Guerrero J, et al. Enzalutamide, an androgen receptor signaling inhibitor, induces tumor regression in a mouse model of castration-resistant prostate cancer. Prostate. 2013 Sep;73(12):1291-305.

[4]. Kim TH, et al. Pharmacokinetics of enzalutamide, an anti-prostate cancer drug, in rats. Arch Pharm Res. 2015 Nov;38(11):2076-82.