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Neurotensin(8-13) | 神经降压素(8-13)
MCE 国际站:Neurotensin(8-13)
中文名:神经降压素(8-13)
CAS:60482-95-3
品牌:MedChemExpress (MCE)
存储条件:Protect from light.Powder: -80°C, 2 years; -20°C, 1 year.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.
生物活性:神经降压素 (8-13) 是神经降压素的活性片段。 Neurotensin(8-13) 导致细胞表面 NT1 受体 (NTR1) 密度降低。 IC50 和目标:NTR1[1]
体外:Neurotensin(8-13) 诱导的受体内化导致细胞表面 NT1 受体 (NTR1) 密度降低。已针对 HT-29 细胞和大鼠原代培养神经元中的神经降压素 (NT) 描述了响应高胞外肽浓度的受体下调。细胞表面受体的再现也不同[1]。
激酶试验:在汇合时对整个 HT-29 细胞进行结合测定。测定前一天,将细胞(106 个细胞/0.4 mL,相当于 0.3 mg 蛋白质)置于 48 孔板中。一种特殊的结合缓冲液,包含蛋白酶抑制剂(50 mM HEPES、125 mM NaCl、7.5 mM KCl、5.5 mM MgCl2、1 mM EGTA、5 g/L 牛血清白蛋白、2 mg/L 糜抑素、100 mg/L 大豆胰蛋白酶抑制剂,50 mg/L 杆菌肽,pH 7.4)用于实验。在抑制研究中,细胞在 37°C 下孵育 1 小时,一式三份,加入 25,000 cpm 的 125I-NT 和不同浓度 (0.001-3,000 nM) 的未标记 NT(8-13)、未标记 NT-VIII 或 NT-VIII用 natRe 标记(每孔最终体积 0.2 mL)。然后用冷结合缓冲液洗涤细胞两次,然后在 37°C 下用 1N NaOH(每孔 0.4 mL)溶解。活性在 γ 计数器中测定。在饱和研究中,将细胞与浓度逐渐增加 (0.1-10 nM) 的 99mTc(CO)3NT-VIII 一起在 37°C 下孵育 1 小时(最终体积,每孔 0.2 mL)。总锝 (99+99mTc) 的浓度相当于每孔 0.2-20 MBq 99mTc 活性。使用与之前相同的结合缓冲液洗涤 2 次后,然后在 37°C 下用 1N NaOH(每孔 0.4 mL)溶解细胞。在 γ 计数器中测量结合的放射性。非特异性结合用 1 μM 未标记的 NT(8-13)[1] 测定。
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研究领域:GPCR/G Protein | Neuronal Signaling
作用靶点:Neurotensin Receptor
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参考文献:[1]. García-Garayoa E, et al. Preclinical evaluation of a new, stabilized neurotensin(8--13) pseudopeptide radiolabeled with (99m)tc. J Nucl Med. 2002 Mar;43(3):374-83.
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