Fluo-3AM

国际站：Fluo-3AM

CAS：121714-22-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：-20°C, protect from light

生物活性：Fluo-3AM(Fluo-3-pentaacetoxymethyl ester) 是一种钙指示剂，结合 Ca2+ 后荧光增强；在涉及笼式螯合剂、第二信使和神经递质的光活化的流式细胞术实验中，以及基于细胞的药理学筛选中，用于成像 Ca2+ 信号的空间动力学。

体外：1. Fluo-3 AM 工作液的配制1.1 制备储存液用无水 DMSO 稀释 Fluo-3 AM 去配制 10 mM 的储备液。注：Fluo-3 AM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的 HBSS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Fluo-3 AM 工作液。注：请根据实际情况调整 Fluo-3 AM 工作液浓度，且现用现配。2. 细胞染色 (悬浮细胞)2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×106/mL2.2 加入 1 mL Fluo-3 AM 工作液，室温孵育 5-30 分钟。2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。3. 细胞染色 (贴壁细胞)3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜进行观察。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

参考文献：[1]. Loughrey, C. M., MacEachern, K. E., Cooper, J., & Smith, G. L. (2003). Measurement of the dissociation constant of Fluo-3 for Ca2+ in isolated rabbit cardiomyocytes using Ca2+ wave characteristics. Cell Calcium, 34(1), 1–9. doi:10.1016/s0143-4160(03)00012-5