微生物对肠漏的作用

1、布拉氏酵母（Saccharomyces boulardii）

非致病性布拉氏酵母菌CNCM I-745在预防和治疗抗生素相关性腹泻、感染性腹泻和功能性腹泻方面显示了其作为益生菌的有效性。布拉氏酵母菌通过多种与肠屏障功能相关的作用机制，在不同病理状态下对肠道菌群的改变和上皮屏障缺陷具有有益的作用。研究良好的布拉氏酵母菌在多种疾病的肠道屏障功能的保存和/或恢复中起着至关重要的作用。

布拉氏酵母菌CNCM I-745（S.boulardii）是1923年法国微生物学家在印度**发现的一种非致病性酵母菌。此后，它作为益生菌被广泛应用于胃肠道疾病的预防和治疗。作为一种酵母菌，布拉氏酵母菌不同于益生菌，特别是因为它对抗生素治疗有内在的抵抗力。布拉氏酵母菌能够适应并存活在胃肠道中，对胃酸和胆汁酸有抵抗力。服用后在2天内达到最高浓度，并在口服后3-5天内在粪便中清除。

布拉氏酵母菌对肠道致病菌引起的肠道通透性改变有纠正作用。布拉氏酵母菌的临床疗效归功于多种对抗多种病原体引起的有害作用的作用。布拉氏酵母菌的作用方式可概括为：

1）管腔作用，指布拉氏酵母菌在管腔内的作用：抗毒素作用，特别是对霍乱毒素和大肠杆菌脂多糖的作用，抗菌活性，调节肠道菌群和代谢活性；

2）在绒毛的营养作用，即，分泌促进消化的酶和诱导宿主消化的酶

3）粘膜作用，指布拉氏酵母菌在黏膜深层的作用，包括抗炎作用。

布拉氏酵母菌的各种作用方式协同作用，以抵抗感染，支持屏障功能和受损肠组织的再生。广泛的非临床数据支持布拉氏酵母菌对抗各种病原体致病性的有益作用。布拉氏酵母菌对上皮修复作用的机制包括：抑制MLC磷酸化、通过TJ保护恢复屏障完整性、降低肠道通透性、减少氯化物分泌和甘露醇流量、分泌的促炎细胞因子水平降低、TNF-α水平降低、通过分泌碱性磷酸酶调节细菌对肠细胞的附着、部分恢复claudin-1表达、通过TJ保护恢复屏障完整性、抑制NF-κB和ERK1/2磷酸化介导的IL-8分泌等（C Terciolo,  et al., 2019.）。

2、益生菌的作用

益生菌干预是增强人类上皮屏障功能的可行方法，对不同的部位（胃vs.肠）影响的方式不同。益生菌通过直接机制和间接机制对抗病原体，保护肠粘膜。

益生菌保护肠粘膜的直接机制是通过共生菌和益生菌相互作用以竞争性抑制的方式调节屏障功能，如与肠道病原体竞争碳水化合物抑制病原体繁殖，从而达到保护肠粘膜的作用。益生菌还可以通过竞争共同的粘附受体来抑制外来病原体在肠粘膜的定植。在各种类杆菌中，VI型分泌系统（T6SS）通过输出抗菌蛋白介导细菌间拮抗的细胞接触依赖机制（Klaenhammer TR, et al., 2012.）。补充乳酸杆菌对饮食诱导的代谢紊乱有积极的影响，包括改善肠屏障功能和减少内毒素血症。长双歧杆菌的作用可能与通过增加肠道REG家族蛋白的表达而增强长双歧杆菌补充剂诱导的屏障功能（Chen JJ, et al., 2011.）。双歧杆菌菌株也被证明在体外竞争性地排除了病原菌与粘膜的结合，提高了紧密连接的完整性。粘杆菌通过增加具有抗炎特性的特异性内源性大麻素（Reg3γ）的产生，增强肠道屏障功能，并增加粘液层厚度（Everard A, et al., 2013）。益生菌还可促进肠上皮细胞增殖和迁移（Preidis GA, et al., 2012.），减少凋亡和促进上皮细胞保护反应，提高肠上皮细胞损伤标志物肠型和肝型脂肪酸结合蛋白（I-FABP和L-FABP）的表达，恢复TJ和粘附连接蛋白的表达和定位，恢复肠粘膜和肌肉层的厚度（Goncalves FLL, et al., 2015.）。

益生菌保护肠粘膜的间接机制是通过宿主模式识别受体（如TLR和NLR）对微生物相关分子模式的识别激活了免疫防御和抗感染。TLR信号通过激活NF-κB导致抗菌肽产生的髓样分化初级反应88（MYD88）诱导肠上皮细胞防御素和Paneth细胞抗菌因子的表达。细菌肽聚糖的核苷酸结合寡聚结构域2（NOD2）识别诱导Paneth细胞表达密码素。感知来自共生微生物的未知信号会刺激3型固有淋巴细胞（ILC）分泌IL-22，该细胞通过肠上皮细胞上的受体（IL-22R）发出信号，以增加岩藻糖基转移酶（FUT）、粘蛋白表达和抗菌剂的表达，包括再生家族成员3（Reg3）蛋白质。节段丝状菌（SFB）与回肠上皮密切相关，刺激B细胞和T细胞的成熟，导致B细胞产生IgA和血清淀粉样蛋白A（SAA）依赖的T辅助细胞17（Th17）分化增强。Th17细胞产生炎性细胞因子和IL-22，它们刺激固有免疫防御机制以对抗感染（P A Bron,  et al., 2017.）。

益生菌还可以发酵益生元活性产生丁酸盐，可增加肠道分泌粘液的产生，并支持调节T细胞功能（Furusawa Y, et al., 2014）。

益生菌可以影响肠屏障功能的各个方面，支持益生菌在涉及肠屏障功能失调的疾病中的治疗潜力。然而，大多数益生菌屏障效应是在体外细胞系和动物模型中研究的，而这些结果在高危人群或患病人群中转化为人体在体内的有效性实际上还未被探索。只有极少数使用益生菌的研究直接评估了人类志愿者的粘膜屏障功能，在测量这一参数的研究中，健康志愿者而非患病人群通常是目标人群（P A Bron,  et al., 2017.）。