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常用DNA分子标记类型和特点总结归纳

已有 25753 次阅读 2013-7-10 10:49 |个人分类:科研方面|系统分类:科研笔记| 分子标记

常用DNA分子标记类型和特点

依据对DNA多态性的检测手段,DNA标记可分为四大类:

第一类为基于DNADNA杂交的DNA标记。主要有限制性片段长度多态性标记(RFLP)、可变数目串联重复序列标记(VNTR)、单链构象多态性RFLP(SSCPRFLP)等;

第二类为基于PCRDNA标记。主要有随机扩增多态性DNA(RAPD),简单重复序列DNA

标记(SSR),测定序列标签位点(STS),表达序列标签(EST),测序的扩增区段(SCAR)

第三类为基于PCR与限制性酶切技术结合的DNA标记。主要有两种,一种是扩增片段艮度多态性(AFLP),第二种是酶解扩增多态顺序(CAPS)

第四类为基于单核苷酸多态性的DNA标记。主要是单核苷酸酸多态性(SNP)

各类常用分子标记的特点和应用如下:

标记名称

引物设计方法

特点

应用

多态性原因

RAPD

以几个随机寡核苷酸(常用10)为引物

简便、易行、灵敏、安全性好、 DNA用量少,能快速进行基因多态性研究,但重复性较差

遗传资源保存、遗传多样性研究、种质资源鉴定、遗传资源分类、品种纯度鉴定、遗传图谱的构建、突变检测、基因标记和基因组比较

多态性是由于引物与不同区段的同源序列结合,产生不同的DNA产物

RFLP

以单拷贝或低拷贝的DNA克隆(基因组

DNAcDNA)作探针

共显性、信息完整、稳定性、重复性好

品种鉴别和品系纯度鉴定、分子标记连锁图谱构建、基因定位、种质鉴定和遗传背景分析、遗传多样性分析

多态性主要足由于限制性内切酶酶切位点或位点间DNA序列中

单碱基的替换、DNA片段的插入、缺失、易位和倒位等引起

SSR

两端序列较保守, SSR引物根据与微卫星重复序两端的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身,从而揭示微卫星的多态性。

共显性、信息完整、稳定性重复性好,操作简单

生物遗传作图、基因定位、群体遗传研究、个体间亲缘关系鉴定

多态性是由于SSR座位的基本单元重复次数的小同而形成

SNP

DNA测序中碱基的峰

高和面积变化,已有DNA序列比较,设计特定区域DNA片段的PCR引物,扩增

相虑DNA片段并进行

序列比较

SNP的数量极其丰

富,并且可以进行自动化检

适应于复杂性状的遗传分析、引起群体差异的基因识别

多态性足由于单个核苷酸的变异所引起

AFLP

用两种能产生黏性末端的限制性内切酶将基因组DNA切割成分子量人小不等的限制性片段,然后将这些片段与其末端互补的已知序列的接头连接,所形成带接头的特异片段用作随后的PCR反应模版,PCR引物5’端与接头和酶切位点序列互补,3’端在酶切位点后增加13个选择性碱基

不需要预先知道

DNA序列信息的情况下就可以同时进行多数DNA酶切片段的PCR扩增,既有RFLP的可靠性又有RAPD的方便性

构建高密度的遗传

连锁图,DNA指纹

图谱构建

多态性是由于酶切位点和其后的选择性碱基的变异

SCAR

根据RAPDAFLP

基序列设计特异引物

克服了RAPD标记

的不稳定性,   AFLP标记的难操作性

生物遗传作图、基因定位

多态性是由于引物与不同区段的同源序列结合,产生不同的DNA产物

CAPS

适合于扩增产物的限

制性内切酶

是一些特异引物

PCR标记的延伸

适应于性状连锁标

记的发掘

多态性是由于特异PCR产物DNA序列内限制性晦切位点变异

 




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