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新的荧光探针可以特异的识别膜蛋白

已有 4220 次阅读 2014-2-18 15:32 |系统分类:海外观察


 




来自日内瓦大学的科学家最近报道了一种新的荧光探针可以特异的识别膜蛋白。这种探针技术可以帮助研究者在活体动物身体内追踪标记的膜蛋白。(ACS Chem. Biol.2014, DOI: 10.1021/cb400819c).

  过去,当科学家用染料标记膜蛋白时,总是要花费时间去洗除一些没有键和在蛋白上的染料分子。不洗除的话,这些没有键合的自由染料分子就会造成背景干扰被标记蛋白的信号。但是,洗除的过程往往需要花费时间而且制约了将这一研究应用于活体细胞。毕竟,你无法在活得老鼠体内洗除这些染料。日内瓦大学的瑞泽曼-霍华德教授比喻。

 瑞泽曼教授和他的同事解决的这一问题。他们选择用一种疏水分子尼罗红作为染料分子,这种染料可以在脂溶性环境下比如细胞膜内发出亮光,但是在水中却不发光。他们将染料通过共价键的方式接在了他们之前设计的一种蛋白标签---SNAP 标签的苄基鸟嘌呤上,从而制成了探针

. 在使用探针之前,科学家们必须为他们感兴趣的膜蛋白的基因加入SNAP-标记物的DNA序列。这样修饰之后,SNAP-tag就可以识别停留在蛋白的表面。一旦细胞表达杂交基因,修饰过的染料分子便会吸附在膜蛋白上,进而插入细胞膜,开始发光。

用这种探针,瑞泽曼教授和他的团队半小时内在仓鼠体内标记了SNAP-tag表达的人类胰岛素受体。下一步,他们计划使用探针去探究果蝇的细胞分裂情况。这种探针还有一个优点是它所发出光的波长能够显示出膜脂质对蛋白的包裹紧密度。科学家希望能够理解这种包裹是如何影响细胞的活动。









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