缺碘性甲状腺肿动物模型【北京动物实验】
【造模机制】缺碘饲料中含碘很低,不能满足机体的需要,因而影响甲状腺激素的合成,导致 TSH 分泌增加,从而引起甲状腺代偿性增生肥大。
【造模方法】
1.动物和低碘饲料 选用 4 周龄 Wistar 大鼠,体重 90~110g,雌雄各半。饲料采用购自严重地方性甲状腺肿病区的粮食配制的低碘饲料,含碘量为 60μg/kg,非缺碘组饮用碘浓度为200μg/kg 的碘酸钾溶液,碘摄人量相当于大鼠生理碘需要量。磨粉后 120℃烘烤 24 小时。将玉米,谷子,黄豆分别按 73％,20％、7%的质量比混和,根据大鼠标准饲料配方的营养要求添加适量的维生素、无机盐等饲料添加剂。氯化钠采用分析纯品,经 750℃烘烤 12小时后使用。
2.模型制备 自由饮用电阻值 2000kQ 以上的去离子水,用上述低碘饲料喂养 3 个月后处死。大鼠处死前于代谢笼中收集 24 小时尿,测尿碘。称体重,然后以 10%水合氯醛腹腔麻醉大鼠,分离甲状腺组织,称重后迅速切成 1mm组织数块,浸人含有 25％戊二醛的二甲砷酸钠缓冲液固定,常规方法制作电镜标本。其余组织迅速置于防冻管并浸入液氮中,然碘甲腺原氨酸(T)、四碘甲腺原氨酸(Ts)的含量。后于-70℃冰箱冻存,用于制作冷冻切片及测定甲状腺内过氧化物酶活性及甲状腺内镇,主定其放射性,计算吸碘率。(FT,)、游离 T,(FT).TSH。大概腹腔注射 Na''1,6 小时后处死取甲状腺,用γ计数仪制3.观察指标制备血清,放射免疫分析法测定血清总 T,(TT,),总 T(TT),游离下,
【模型特点】
1.给予 4 周龄 Wistar 大鼠低碘饲料和去离子水喂养 3 个月、尿碘中位数、甲状腺组织碘和激素含量及血清总甲状腺素水平显著降低,甲状腺相对重量、吸碘率、蛋白水解酶活性和血清甲状腺刺激激素水平显著增加。甲状腺在光镜下呈增生性甲状腺肿的表现。缺碘大鼠甲状腺明显肿大、充血,甲状腺相对重量明显增大,尿碘含量显著降低,甲状腺组织勾浆碘、T 和 T,含量显著降低。
2.缺碘大鼠模型与非缺碘大鼠相比,甲状腺吸碘率显著升高,甲状腺过氧化物酶比活性有升高趋势,血清 FT 呈下降趋势,TT,显著下降,FT,和 TTs呈升高趋势,TSH 显著升高。
3.光镜下缺碘大鼠甲状腺病理表现为增生性甲状腺肿,滤泡变小,变形,上皮细胞增生肥大,呈高柱状复层排列,有时形成乳头状向滤泡腔内突起,滤泡和滤泡之间界限不清,滤泡腔内胶质稀薄。电镜下可见内质网明显扩张;线粒体肿大,嵴明显。随缺碘时间延长,内质网高度扩张,呈囊泡状,基质减少,甚至出现粗面内质网上的核糖体解聚、脱颗粒,线粒体被扩张的内质网所包绕,有的线粒体出现肿胀,嵴变形,模糊,有的嵴消失呈空泡化,且基质减少。
【应用范围】本模型模拟缺碘地区普通人群的甲状腺状态,为地方性甲状腺肿的研究提供了可靠的动物模型。对于致甲状腺肿物质以及由于某些酶的缺陷引起的甲状腺激素合成障碍导致的甲状腺肿,与本模型有共同的发病机制,因此本模型也适用于上述疾病发病过程及治疗方法的研究,但涉及病因的研究则不适用。
【注意事项】配制饲料的粮食中碘含量必须保证足够低,最好采自地方性甲状腺肿病区;饮水应为去离子水;同时,饲养环境中空气的含碘量可成为本模型成功与否的影响因素,因此,本模型的复制应在设有空气滤过装置的屏障环境中进行。
【模型评估】本模型的复制方法简便易行,可以人为地严格控制实验条件。可同时成功地复制成缺碘性甲状腺肿及甲状腺功能减退模型。适用于人类地方性甲状腺肿的各项研究。由于大鼠对缺碘的敏感性比小鼠高,而 Wistar 大鼠对蛋白质,维生素的要求不高,无自身免疫倾向,接受低碘(15~18jμg/kg)1 个月即出现甲状腺增大,因此是用来复制缺碘动物模型较合适的品种。
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