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推荐两种培养慢生菌根瘤菌和中慢生根瘤菌的培养基

已有 7311 次阅读 2012-1-24 10:39 |个人分类:根瘤菌分类|系统分类:科研笔记| 慢生根瘤菌培养基

我们通常用YMA培养基培养根瘤菌,但在YMA培养基上,慢生根瘤菌属和中慢生根瘤菌属的菌株生长缓慢,因此选用其它的培养基可以提高生长速率,可以尝试一下:
培养慢生根瘤菌属的培养基:MAG, modified arabinose-gluconate medium

           MAG Media Reagents (per liter)

1.1g MES [2-(N-Morpholino)- ethanesulfonic acid,吗啉代乙磺酸, SIGMA货号M3671/M2933,产品CAS号:4432-31-9,生物缓冲剂

1.3g HEPES [4-(2-hydroxyethyl)-1-Piperazineethanesulfonic acid, Hepes, 羟乙基哌嗪乙硫磺酸,一种缓冲液]

1.0g Arabinose (DL)

1.0g Gluconic Acid~Sodium Salt)

1.0g Yeast extract

2ml KH2PO4 Solution (110g/L)

4ml Na2SO4 Solution (62.5 g/L)

1ml MgSO4 • 7H2O Solution (180g/L)

2ml NH4Cl Solution (160g/L)   

      1ml CaCl2 Solution (13g/L)

1ml FeCl3 • 6H2O Solution (6.7g/L)

Adjust pH to 6.6 with KOH

Autoclave for 40 minutes

MAG培养基来自文献:

Sachs, J.L., Kembel, S.W., Lau, A.H., Simms, E.L. (2009) In Situ phylogenetic structure and diversity of wild Bradyrhizobium communities. Appl. Environ. Microbiol. 75, 4727-4735.

在Sachs的新的一篇论文中提到,使用MAG培养基可以提高日本慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)的生长速率(MAG media was chosen because B. japonicum grows rapidly in the medium.)。该文献如下:

Sachs, J.L., Russell, J.E., Hollowell, A.C. (2011) Evolutionary instability of symbiotic function in Bradyrhizobium japonicum. PLoS One 6, e26370. 【这篇文献也是慢生根瘤菌试验进化的好文献,值得参考!

 
培养中慢生根瘤菌属的培养基:M-YMA, modified YMA:
 
D-mannitol, 10g; yeast extract, 1g; L-glutamate sodium, 0.5g; K2HPO4, 0.5g; MgSO4, 0.1g; NaCl, 0.05g; CaCl2, 0.04g; FeCl3,0.04g; agar, 15-20g; distilled water, 1L; pH 6.8
M-YMA培养由Peter Kämpfer建议使用。我们已用于培养中慢生根瘤菌属的细菌,在发表木垒中慢生根瘤菌新种(Mesorhizobium muleiense sp. nov.)时用到。论文见:
 
也可以试试用其中的一种培养基培养这两类细菌。


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