|
国际站:Mag-Fluo-4 AM
CAS:1097709-31-3
品牌:MedChemExpress (MCE)
存储条件:Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
生物活性:Mag-Fluo-4 AM 是一种荧光染料。 Mag-Fluo-4 AM 可用于测量内质网 (ER)[1] 中游离 [Ca2+] 的变化。
体外:1. Mag-Fluo-4 AM 工作液的配制1.1 制备储存液用无水DMSO 稀释 Mag-Fluo-4 AM 去配制 10 mM 的储备液。注:Mag-Fluo-4 AM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的 HBSS 稀释储存液,配制成 1-10 μM 的 Mag-Fluo-4 AM 工作液。注:请根据实际情况调整 Mag-Fluo-4 AM 工作液浓度,且现用现配。2. 细胞染色 (悬浮细胞)2.1 离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在1×106/mL2.2 加入 1 mL Mag-Fluo-4 AM 工作液,室温孵育 5-30 分钟。2.3 400 g,离心 3-4 分钟,弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。2.5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。3. 细胞染色 (贴壁细胞) 3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育 5-30 分钟。3.4 吸去染料工作液,用培养基洗 2-3 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜进行观察。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
参考文献:[1]. Rossi AM, et al. Reliable measurement of free Ca2+ concentrations in the ER lumen using Mag-Fluo-4. Cell Calcium. 2020 May;87:102188.[2]. Gee KR, et al. Chemical and physiological characterization of fluo-4 Ca(2+)-indicator dyes. Cell Calcium. 2000 Feb;27(2):97-106.
Archiver|手机版|科学网 ( 京ICP备07017567号-12 )
GMT+8, 2024-7-22 01:26
Powered by ScienceNet.cn
Copyright © 2007- 中国科学报社