仇伟伟
适用于细胞核、细胞膜、线粒体、细胞骨架的成像的荧光探针推荐 | MedChemExpress
2022-8-17 13:17
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细胞核荧光试剂

细胞核 (nucleus) 是真核细胞内最大、最重要的细胞结构,作为细胞遗传与代谢的调控中心,是真核细胞区别于原核细胞最显著的标志之一。MCE 提供的细胞核荧光探针可对细胞或组织直接染色,从而实现对细胞核的定位,确定细胞在组织中的分布,并追踪细胞从有丝分裂到凋亡整个过程中细胞核的变化。


表 1. 用于细胞核荧光试剂


图 1. HA-nsp4 载体转染 PK-15CD163 细胞[1]

转染 24 小时后进行细胞固定,用胆固醇染料 Filipin (蓝色) 确定胆固醇含量。细胞核用碘化丙啶 (红色) 复染。


细胞骨架荧光试剂

鬼笔环肽 (Phalloidin) 是从鬼笔鹅膏中分离到的一种环状七肽毒素,以极高的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝 F-actins。通常将鬼笔环肽与荧光染料偶联来研究细胞中 F-actins 的分布。


荧光标记的鬼笔环肽极少会非特异性染色,染色和未染色区域之间的对比度非常大,可使 F-actins 高效染色。


表 2. MCE 细胞骨架荧光试剂


图 2. MDA-MB-231 细胞、CTCF-in 细胞的细胞骨架[2]

共聚焦显微镜捕获细胞。蓝色通道,细胞核 Hoechst 染色;红色通道,F-actins 被 Rhodamine Phalloidin 染色;以上通道的组合;白色循环和箭头,扩散的细胞周肌动蛋白纤维。


线粒体荧光试剂

ΔΨm 即线粒体膜电位 (mitochondrial membrane potential, MMP),它的变化是反映线粒体活力的重要参数。线粒体膜电位越高,线粒体产生的能量越多,越能促进细胞能量转换。线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件。


MCE 线粒体膜电位荧光试剂,可以快速检测线粒体膜电位下降,作为细胞凋亡早期的检测指标。JC-1 线粒体膜电位试剂盒 (HY-K0601) 同时提供 CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照,可用于细胞、组织或纯化的线粒体等样本的线粒体膜电位检测。


图 3. 线粒体膜电位变化

表 3. 线粒体膜电位荧光试剂

图 4. JC-1 染色测定线粒体膜电位[3]
KRA-533 诱导 caspase 3 激活并降低 NSCLC 细胞中的线粒体膜电位


细胞膜荧光试剂

细胞膜主要是由磷脂构成的富有弹性的半透性膜,为细胞结构中分隔细胞内、外不同介质和组成成分的界面。Di 系列荧光试剂可侧向扩散染色整个细胞,是便捷的细胞轮廓标记物,DiO、DiI、DiD 被激发后分别发出绿色、橙红色、红色荧光。


表 4. MCE 细胞膜荧光试剂


图 5. 三种探针复染确定 Ecto-CRT 易位至细胞表面[3]
细胞膜探针 DiI(红色)、细胞核探针 DAPI(蓝色)、FITC 偶联的二抗(绿色)


细胞质荧光试剂

细胞质是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。在细胞增殖与活性相关研究中,细胞质染料可用于分析细胞活性、监测细胞的形态和位置等。


表 5. MCE 细胞质荧光试剂


图 6. CFSE 染色

PC-3 细胞用载体或 MTX 处理 20 小时,收集细胞并用 CFSE 标记。与 CellTracker Deep Red 标记的 MoDCs 细胞共孵育 2 小时,流式细胞术分析细胞吞噬作用。


关于细胞染色,小 M 今天就介绍到这里了,小伙伴们有没有 Get 到新技能呢?


参考文献

1. Wenting Ke, Yanrong Zhou, Yinan Lai, Siwen Long, Liurong Fang, Shaobo Xiao. Porcine reproductive and respiratory syndrome virus nsp4 positively regulates cellular cholesterol to inhibit type I interferon production. Redox Biol. 2021 Dec 8;102207.
2. Jialun Duan, Chunjie Bao, Ying Xie, Wanliang Lu, et al. Targeted core-shell nanoparticles for precise CTCF gene insert in treatment of metastatic breast cancer. Bioact Mater. 2021 Oct 7;11:1-14.
3. Ke Xu, Dongkyoo Park, Xingming Deng, et al. Small Molecule KRAS Agonist for Mutant KRAS Cancer Therapy. Mol Cancer. 2019 Apr 10;18(1):85.
4. Feng-Ying Huang, Jin-Yan Wang, Shu-Zhen Dai, et al. A recombinant oncolytic Newcastle virus expressing MIP-3α promotes systemic antitumor immunity. J Immunother Cancer. 2020 Aug;8(2):e000330.
5. Changlin Li, Benyi Li, et al. Mitoxantrone triggers immunogenic prostate cancer cell death via p53-dependent PERK expression. Cell Oncol (Dordr). 2020 Dec;43(6):1099-1116.

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