在分析流式数据时可能会需要编辑一些公式，最常见的是计算两个参数的比率。比如在利用Indo-1测量钙离子流量的实验中，计算Indo-1 violet和Indo-1 blue这两个参数的比率（Figure 1）；在报告基因分析时，计算EGFP表达量和DsRed表达量之比（Figure 2）。在Figure 2中，流式仪上采集到的只有EGFP和DsRed的荧光参数，分析数据的时候需要的参数是EGFP/DsRed之比。这种情况下，可以使用FlowJo的衍生参数（Derived Parameters）功能，通过编辑公式新建EGFP/DsRed这个参数。

  

以Figure 2为例，通过衍生参数功能添加EGFP/DsRed参数的步骤如下：

1. 到“Tools”菜单栏里选择“Derived Parameters”，新建一个衍生参数并命名为EGFP_DsRed_ratio

2. 编辑公式：在Insert Reference中选择FL1::EGFP，选择÷，再选择FL2::DsRed

3. 确定参数的属性：由于是荧光参数之间的比率，一般用Log轴；设置参数轴的最小值为0.01，最大值为1000

4. 选择Apply to group，将新建的EGFP/DsRed添加到该组实验的所有样本中。

5. 得到的EGFP_DsRed_ratio参数的点图和直方图如下图所示： 

在衍生参数功能中，还可以根据需要编辑许多公式，如下图所示：

此外，在表格编辑器中也可以编辑公式，对得到的数据结果进行运算，比如在下面的抗体滴定实验的例子中，需要确定CD8-FITC抗体的最佳稀释浓度，可以通过CD8-FITC阳性细胞群和CD8-FITC阴性细胞群MFI（Median Fluorescence Intensity）的比率来确定。

 

步骤如下：

1. 将CD8-FITC Median和CD8-FITC+ Median拖入表格编辑器，点击添加列按钮

 

2. 在Column Information窗口中选择Formula选项卡

3. 编辑公式，CD8-FITC+ Median除以CD8-FITC- Median

4. 点击OK确认

5. 在表格编辑器中点击Batch按钮进行批处理

6. 得到结果如下表，随着抗体浓度的增大，阳性群和阴性群MFI的比率不断增大，当抗体浓度增大到1之后，MFI ratio没有大的变化，因此可以确定最佳抗体稀释浓度为Sample 3所在的抗体浓度。