线粒体对铁死亡的必要性
2022-10-14 17:37
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为了检查线粒体对铁死亡的必要性,用一组铁死亡诱导化合物处理了表达 YFP-Parkin 的 HT-1080 细胞。所有经过测试的铁死亡诱导剂都以与含有线粒体的细胞类似的氧化、剂量依赖性方式有效杀死了线粒体耗尽的细胞,表明线粒体的存在不是铁死亡所必需的。 Staurosporine 是一种线粒体依赖性细胞凋亡的诱导剂,在所有测试浓度下均未造成活力损失,这证实了线粒体已被有效且功能性地去除,并且正如预期的那样,staurosporine 诱导的细胞凋亡需要线粒体。值得注意的是,系统 xc-(erastin 和 IKE)的抑制剂在 CCCP 治疗后(即线粒体自噬后)都变得不太有效,而靶向 GPX4 的 RSL3 和 FIN56 在线粒体自噬后都变得更有效。当在铁死亡诱导时停用 CCCP 时,FIN56 和 RSL3 的这些效力变化没有显着变化,证实这些效力变化是线粒体自噬的直接结果,而不是 CCCP 存在的脱靶效应。相对于用 CCCP 处理的野生型 HT-1080 细胞,线粒体耗尽的 HT-1080 细胞中 GPX4 蛋白(铁死亡的主要调节因子)的水平没有降低。此外,用 CCCP 处理的野生型 HT-1080 细胞仍然对星形孢菌素敏感,并且对铁死亡诱导剂的敏感性没有变化,除了对上述系统 xc 抑制剂的适度抗性。
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