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美国麻省理工学院Pranam Chatterjee研究团队宣布他们研制了具有广泛原间隔子相邻基序（PAM）范围、高特异性和活性的工程化ScCas9。该项研究成果在线发表在2020年5月11日的《自然-生物技术》上。

研究人员结合了多个直系同源物的蛋白质基序，工程化改造了犬链球菌Cas9的两个变体-Sc ⁺⁺和高保真度的突变型HiFi-Sc ⁺⁺-使改造后的变体具有广泛的5'-NNG-3'PAM相容性、强大的DNA切割活性和最小的脱靶效应。 Sc ⁺⁺和HiFi-Sc ⁺⁺扩展了CRISPR编辑在各种序列中的应用。

研究人员表示，CRISPR酶在靶切割位点附近需要一个PAM序列，这限制了可编辑的序列。

附：英文原文

Title: An engineered ScCas9 with broad PAM range and high specificity and activity

Author: Pranam Chatterjee, Noah Jakimo, Jooyoung Lee, Nadia Amrani, Toms Rodrguez, Sabrina R. T. Koseki, Emma Tysinger, Rui Qing, Shilei Hao, Erik J. Sontheimer, Joseph Jacobson

Issue&Volume: 2020-05-11

Abstract: CRISPR enzymes require a protospacer-adjacent motif (PAM) near the target cleavage site, constraining the sequences accessible for editing. In the present study, we combine protein motifs from several orthologs to engineer two variants of Streptococcus canis Cas9—Sc++ and a higher-fidelity mutant HiFi-Sc++—that have simultaneously broad 5′-NNG-3′ PAM compatibility, robust DNA-cleavage activity and minimal off-target activity. Sc++ and HiFi-Sc++ extend the use of CRISPR editing for diverse applications.

DOI: 10.1038/s41587-020-0517-0

Source: https://www.nature.com/articles/s41587-020-0517-0

Nature Biotechnology：《自然—生物技术》，创刊于1996年。隶属于施普林格·自然出版集团，最新IF：68.164
官方网址：https://www.nature.com/nbt/
投稿链接：https://mts-nbt.nature.com/cgi-bin/main.plex