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转盘共聚焦荧光显微镜

已有 14912 次阅读 2012-6-8 17:46 |个人分类:科普资料|系统分类:科普集锦| style, 仪器, 显微镜, 联系电话, 安道尔

仪器的基本信息

    为适应当前生命科学对活细胞成像速度的要求,高速(转盘)共聚焦显微镜应运而生,它们在获得高质量图像的同时,显著提高了成像速度,捕捉到样品的细微动态变化,同时有效保护样品。

高速共聚焦成像系统可以实现高速获取高质量的动态图像,同时大幅降低激光的强度,降低激光对细胞的光损伤和对荧光染料的淬灭,增强对样品的保护,可广泛应用于细胞生物学、分子生物学、药理学、分子病理学、遗传学等多个学科。

    高速共聚焦采用转盘式激光共聚焦技术,与普通单点扫描激光共聚焦技术(包括双光子共聚焦显微镜:主要用于很厚的样品如脑片,穿透深度大,但是要用低倍物镜如10X20X,分辨率差)相比,它能够观察活细胞生命活动,以及生物大分子相互作用的动态过程,而不仅仅是静态结果。同时,扫描速度和图像信噪比较单点扫描激光共聚焦技术成倍提高。分辨率为512×512时,高速激光共聚焦扫描速度为31/秒,而单点扫描激光共聚焦为4/秒,图像信噪比是单点扫描激光共聚焦的6倍。该集成系统由研究级全电动倒置荧光显微镜、双转盘式激光共聚焦扫描单元、单光子级EMCCD、激光光源及激光耦合单元、高速压电陶瓷Z轴、显微镜用CO2培养室、6D图像采集控制软件和图象工作站等部件组成,可实现多视野的6维程序(XY-Z-T-λ波长-P位置)共聚焦图象程序获取,适合活细胞的各种实验研究,包括:蛋白转运、受体内吞、生物大分子跨膜、电压敏感染料、荧光迁移和共定位、信号转导、囊泡运输、生物大分子组装,以及对活细胞进行长时程观察实验,如细胞发育、细胞分化、细胞凋亡、细胞骨架动力学、FRET、发育生物学和细胞周期研究、单分子荧光探测、配体受体结合、钙火花、钙离子图象等研究。

仪器名称:转盘共聚焦显微镜

型   号:Andor  & leica

制 造 商:英国 安道尔 德国莱卡

产  地:英国 & 德国

购买年份:2011年

仪器用途

主要用于分析:细胞及生物荧光样品观察分析,荧光原位杂交分析,蛋白亚细胞定位分析,蛋白相互作用,3D成像技术,时间序列成像,快速成像系统等

仪器的性能指标

主机:莱卡 倒置荧光显微镜。

20×、40×、100×(oil)高端物镜。

显微镜系统滤光镜:紫外、蓝色、绿色荧光滤块。

转盘系统滤光片组合:GFP/DsRed;GFP/YFP;DAPI/FITC/TRITC/Cy5。

高速转盘系统

全自动模块,X,Y,Z。

ANDOR高制冷CCD,制冷温度-45℃。

三维重构:通过Z-stack扫描,用软件重构细胞组织内3D真实空间结构

荧光的定性、定量分析:可荧光细胞的形态学特性并进行定量分析



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